- 吴昌旭;张金武;彭春子;吕茂杰;梁静;蒋凯屹;赖鹏羽;韦英益;陈海兰;何家康;胡庭俊;于美玲;
为优化转铁蛋白（Tf）修饰的辣蓼黄酮（FPHL）脂质体（Tf-FPHL-Lip）的最佳制备工艺，明确其表征和体外释放特性，本试验首先利用乙醇注入法、薄膜分散法和逆向蒸发法制备辣蓼黄酮脂质体（FPHL-Lip），优选出包封率最高的制备方法。以包封率为考察指标，通过单因素试验和Box-Behnken响应面法优化FPHL-Lip制备工艺；利用二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000-羧酸（DSPE-PEG2000-COOH）上的活性末端羧基将Tf和脂质体在催化剂作用下连接，通过单因素试验优化Tf-FPHL-Lip的制备工艺，并对其形态、粒径、多分散指数（PDI）、Zeta电位和体外释放情况进行考察。结果显示，薄膜分散法制备Tf-FPHL-Lip的最优条件是磷胆比为6.28∶1、药脂比为1∶6.48、制备温度为58.48℃、水化体积为15 mL、表面活性剂浓度为7.5 mg/mL、超声时间为6 min、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(DSPE-MPEG2000)与磷脂的摩尔比为6%、DSPE-PEG2000-COOH与DSPE-MPEG2000的摩尔比为5%、1-乙基-（3-二甲基氨基丙基）碳二亚胺盐酸盐（EDC）、N-羟基琥珀酰亚胺（NHS）与DSPE-PEG2000-COOH的摩尔比为10∶10∶1,Tf与DSPE-PEG2000-COOH的摩尔比为1∶40；在优化条件下制备的Tf-FPHL-Lip平均包封率为（63.35±3.41）%，平均粒径为（96.46±1.32）nm，平均PDI为0.312±0.029，平均Zeta电位为（-2.02±0.22）mV，平均连接率为（68.64±0.07）%，眼观为淡黄色、澄清、透明的液体，在电镜下为单层脂质体，呈球形，表面完整，粒径约100 nm；相对于FPHL,Tf-FPHL-Lip在体外具有明显的缓释作用。结果表明，优化的制备条件稳定可行，所制备的Tf-FPHL-Lip包封率较高，粒径小且均匀，为Tf-FPHL-Lip的进一步开发利用提供理论基础。
2025年03期 v.61 1-11页 [查看摘要][在线阅读][下载 2447K] [下载次数：380 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 牛梦楚;任凌仪;马箐阳;杜倩笙;易丹丹;吴春璇;张思媛;何家康;
为了制备芒果苷（MGF）-莱鲍迪苷A (RebA)自组装纳米胶束（MGF-RebA SNM），并对其进行质量评价，本试验建立高效液相色谱（HPLC）方法对MGF-RebA SNM中MGF含量进行测定，考察该方法的专属性、精密度、重复性、稳定性和加样回收率；采用单因素试验考察RebA用量、 MGF用量、超声功率、超声时间和有机相比例对包封率（EE）的影响；以EE为响应值，运用Box-Behnken响应面法（RSM）优化处方；使用最优处方制备MGF-RebA SNM，测定EE、粒径、多分散指数（PDI）和Zeta电位，进行形态学观察和体外累积释放度考察，以评价其性质。结果显示，MGF含量测定方法学考察指标均良好，符合HPLC分析方法学要求；MGF-RebA SNM的最优制备工艺条件为：RebA用量11.6 mg,MGF用量12.0 mg，超声功率30%，超声时间15 min，乙醇体积34.4 mL（总体积50 mL）；此条件下制备的MGF-RebA SNM样品EE为（87.14±0.56）%，粒径为（135.8±3.9）nm,PDI为0.149±0.011,Zeta电位为（-27.0±1.6）mV，外观为淡黄色澄清液体，透射电子显微镜下形态呈规则的球形，6 h累积释放度为91.43%，明显优于MGF原料药（71.40%），即胶束的形成改善了MGF的体外累计释放度。结果表明，本试验制备的MGF-RebA SNM的EE高，粒径小且均匀，体外释放度良好，可为MGF新剂型的研发提供一定的参考依据。
2025年03期 v.61 12-21页 [查看摘要][在线阅读][下载 2404K] [下载次数：284 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 李玉林;周方方;闫生辉;于巧玲;王继创;石盼盼;王云龙;
为了探究两种分子内佐剂促吞噬肽Tuftsin和破伤风毒素肽TT联合作用对非洲猪瘟病毒（ASFV）重组蛋白P753体液和细胞免疫的影响，本试验采用生物信息学软件确定了ASFV结构蛋白P72、P54和P30的优势表位并构建重组载体pET-28a(+)-p753和pET-28a(+)-p753-Tuftsin-TT，利用大肠杆菌表达系统表达重组蛋白，经纯化和透析复性后采用蛋白质印迹法（Western blot）和斑点酶联免疫吸附测定（Dot-ELISA）鉴定重组蛋白的免疫原性和免疫反应性。将2种重组蛋白与兽用商品化疫苗佐剂ISA 61 VG混匀后免疫小鼠，通过检测小鼠血清抗体水平、脾脏淋巴细胞增殖情况和细胞因子（IL-2、IL-4和IFN-γ）分泌水平来评价2种重组蛋白诱导的体液和细胞免疫效果。结果显示，2种重组蛋白在37℃、0.5 mmol/L IPTG条件下诱导表达4 h时以包涵体形式表达且表达量最高，经纯化复性后均具有免疫原性和免疫反应性。免疫小鼠后，P753组和P753-Tuftsin-TT组抗体水平均在首免42 d进入平台期，抗体水平均高于PBS组，其中，P753-Tuftsin-TT组抗体水平最高，抗原刺激指数和细胞因子（IL-2、IL-4和IFN-γ）含量极显著高于P753组（P <0.000 1）。结果表明，分子内佐剂Tuftsin和TT联合使用可显著提升P753重组抗原引起的体液和细胞免疫应答能力，为ASFV亚单位疫苗佐剂的研发提供参考。
2025年03期 v.61 22-28页 [查看摘要][在线阅读][下载 1537K] [下载次数：118 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 姜雪洁;李盈;钱伟东;白云龙;邵广;张国华;马广权;贾斌;夏成;徐闯;
本试验旨在通过调查我国规模化牧场犊牛腹泻的发病情况、诊疗方法、防治措施及其治疗成本，为牧场犊牛腹泻的治疗与防控提供科学依据和新思路。2022年对我国规模化牧场（存栏量大于200头）进行调研，共收集86份牧场返回的问卷，主要分布在河北省、黑龙江省、陕西省、北京市和上海市，涵盖154 014头在群牛。结果显示，腹泻率方面，存栏> 5 000头牧场的犊牛腹泻发病率最低，而存栏1 000～2 000头和2 001～5 000头牧场的发病率较高。治愈率方面，存栏2 001～5 000头牧场最高，其次是存栏1 000～2 000头牧场，而存栏<1 000头和> 5 000头牧场的治愈率较低。59家牧场的犊牛腹泻发病率控制在2%～6%，而48家牧场的治愈率达到95%以上。牧场通过卫生管理、定期消毒、饲喂初乳、独立饲养和疫苗免疫等方法来降低腹泻发生率。犊牛腹泻常用诊断方法包括观察粪便性状、精神状态、脱水程度和采食量等。犊牛一旦发生腹泻，常用抗生素、补液、维生素、强心、制止渗出和抗炎进行治疗。犊牛腹泻发病率与奶牛单产水平呈弱负关联，与全年总淘汰率呈弱负关联，与犊牛死淘率呈中等正关联。治疗成本分析显示，犊牛腹泻的治疗成本与发病率密切相关，发病率较高牧场的治疗成本更高；而单产水平较高的牧场通常具有更高效的疾病管理策略，从而治疗成本较低。结果表明，规模化牧场应持续优化饲养管理以减少犊牛腹泻的发生，提高牧场整体效益。
2025年03期 v.61 29-38页 [查看摘要][在线阅读][下载 1221K] [下载次数：227 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：0 ] - 朱浩瀚;赵帅阳;张少华;张楚晗;苏书晓;关贵全;殷宏;罗建勋;刘军龙;
为了解我国西藏自治区日喀则市藏羊梨形虫病的流行情况，本试验采集了366份藏羊血液样品并提取基因组DNA，采用巢式PCR方法对藏羊梨形虫病病原进行检测和鉴定，并基于梨形虫18S rRNA基因序列构建系统进化树。结果显示，梨形虫阳性率为35.79%(131/366)，其中绵羊泰勒虫阳性率为35.25%(129/366)，环形泰勒虫阳性率为0.55%(2/366)；系统进化树结果显示，该地区绵羊泰勒虫与中国新疆株（GenBank:FJ603460）、土耳其株（GenBank:AY260172）和苏丹株（GenBank:AY260171）处于同一分支；环形泰勒虫与意大利株（GenBank:MT341858）、土耳其株（GenBank:524666）和中国内蒙古株（GenBank:EU083801）处于同一分支。本试验首次报道了西藏地区存在绵羊泰勒虫，为西藏地区羊梨形虫病的流行病学调查和综合防控提供了数据参考。
2025年03期 v.61 39-43页 [查看摘要][在线阅读][下载 1255K] [下载次数：122 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 李星颖;谢梓民;原耀贤;孙铭澮;江文康;赵明明;何诗;何静;赖健仪;白银山;陈胜锋;陈志胜;马骏;王丙云;
为了提高猫传染性腹膜炎（FIP）的临床检出率，本试验根据猫传染性腹膜炎病毒（FIPV)M基因设计特异性引物，将扩增的目的基因连接到p MD19-T载体上，获得重组质粒并作为标准阳性模板，建立针对FIPV的SYBR Green实时荧光定量PCR(q PCR）检测方法，并对其特异性、敏感性、重复性和临床检出率进行验证。结果显示，本方法梯度稀释的标准品与Ct值呈良好的线性关系，R~2=0.999 9，扩增效率为92.4%；与其他猫常见病毒未发生交叉反应；最低检测限为3.48×10~2 copies/μL，敏感性是普通PCR检测方法的100倍；该方法重复性好，批内和批间变异系数均小于2.4%；应用该方法对临床阳性样本的检出率为100%，阴性样本检出率为0。结果表明，本试验建立的SYBR Green q PCR检测方法特异性强、敏感性高、重复性好、临床检测效果佳，可用于FIPV的临床诊断。
2025年03期 v.61 44-49页 [查看摘要][在线阅读][下载 1629K] [下载次数：597 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：2 ] - 康艳华;钟翌芃;马强;梁书坤;钟友刚;
为了解奶牛乳房炎源金黄色葡萄球菌（S. aureus）对临床常用β-内酰胺类抗生素的耐药情况，及血根碱（SAN）与β-内酰胺类抗生素对耐药S. aureus的协同抑菌作用，本试验从临床型奶牛乳房炎样本中分离得到57株S. aureus，采用微量肉汤稀释法检测8种临床常用β-内酰胺类抗生素对其的最小抑菌浓度（MIC）；采用微量肉汤棋盘稀释法检测SAN与β-内酰胺类抗生素的联合抑菌指数（FICI），通过体外时间-杀菌曲线检测SAN协同β-内酰胺类抗生素对S. aureus的杀伤作用。结果显示，S. aureus对β-内酰胺类抗生素的耐药率为59.65%，其中对氨苄西林（40.35%）、青霉素（35.09%）和阿莫西林（35.09%）严重耐药；SAN对青霉素、氨苄西林、阿莫西林和头孢氨苄均有协同作用，可降低β-内酰胺类抗生素MIC 2～64倍；时间-杀菌曲线显示，SAN可以增强青霉素、氨苄西林、阿莫西林和头孢氨苄对耐药S. aureus的杀伤作用。结果表明，SAN能够抑制耐药细菌的生长，恢复β-内酰胺类抗生素对S. aureus的抗菌活性，为S. aureus导致的奶牛乳房炎的治疗提供科学参考。
2025年03期 v.61 50-57页 [查看摘要][在线阅读][下载 2092K] [下载次数：358 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 元娜;邵明珠;吕凤霞;窦丽娜;李向清;赵宝凯;董世山;
为了分析猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）遗传变异特性，本试验对来自山西省某猪场疑似感染PRRSV的母猪血清和仔猪肺脏组织样品进行PRRSV实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)检测，阳性肺脏组织样品研磨液接种于猪肺泡巨噬细胞（PAMs），将出现细胞病变的PAMs进行有限稀释法纯化后用间接免疫荧光（IFA）鉴定，利用逆转录PCR(RT-PCR)分段扩增分离毒株全基因组序列，并用分子生物学软件进行开放阅读框5(ORF5)基因和全基因组的同源性和遗传进化分析、非结构蛋白2(Nsp2)氨基酸特征及全基因组序列的重组分析。结果显示，qRT-PCR检测样品总阳性率为80%(16/20)，从PRRSV阳性仔猪肺脏组织中分离获得1株PRRSV，命名为SXZY202301；分离毒株基因组全长15 021 bp，与NADC30毒株的核苷酸同源性达到90.4%，在遗传进化树中处于同一分支，属于Sublineage 1.8;ORF5基因与IA/2014/NADC34毒株的ORF5基因高度相似，同源性达到了95.1%，在遗传进化树中处于同一分支，属于Sublineage 1.5；分离毒株与类NADC30毒株Nsp2氨基酸序列具有相同的131个氨基酸缺失的典型特征；重组分析结果显示，SXZY202301存在6个重组位点，是以类NADC30毒株为主要亲本，以JXA1毒株和类NADC34毒株为次要亲本的多毒株重组类毒株。本试验为进一步研究PRRSV的重组和演化提供参考。
2025年03期 v.61 58-65页 [查看摘要][在线阅读][下载 1935K] [下载次数：336 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 剧慧栋;肖霄;张琳琳;王名玉;赵宁;杨欣颖;回艳淑;菅蕊;
为了分析3种圆形亚科线虫的形态特征及其系统发育关系，本试验利用扫描电子显微镜（SEM）对寄生于马属动物肠道内的短尾三齿线虫（Triodontophorus brevicauda Boulenger, 1916）、细颈三齿线虫（Triodontophorus tenuicollis Boulenger,1916）和伊氏双齿口线虫（Bidentostomum ivaschkini Tshoijo, 1957）的体表结构进行详细观察和测量，对其核糖体内转录间隔区（ITS）基因进行PCR扩增和测序，将获得的序列进行同源性分析并建立系统发育树。SEM观察结果显示，短尾三齿线虫外叶冠较短，呈小刺状，雄虫46枚，雌虫64枚；雄虫尾端交合伞缘锯齿状，有1对线状交合刺，末端有倒钩。细颈三齿线虫外叶冠短小，呈刺状，雄虫45枚，雌虫49枚；雄虫交合伞缘锯齿状，有1对线状交合刺，末端有倒钩，生殖锥附属物不发达。伊氏双齿口线虫外叶冠宽大，雌雄虫均有8枚，内叶冠细小；雄虫交合伞长，边缘光滑，背叶形状窄长，生殖锥极长，末端具3个囊状突起。系统发育树结果显示，三齿属线虫和双齿口属线虫亲缘关系较近且相互独立，圆形属与三齿属和双齿口属线虫亲缘关系较远，细颈三齿线虫与日本三齿线虫（Triodontophorus nipponicus）亲缘关系较近，短尾三齿线虫与锯齿三齿线虫（Triodontophorus serratus）亲缘关系较近。本试验结果为上述3种线虫的形态特征提供了更丰富的数据，并利用系统发育分析描述了3种线虫间的亲缘关系。
2025年03期 v.61 66-73页 [查看摘要][在线阅读][下载 2249K] [下载次数：310 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 李建;辛凌翔;王秀丽;任小侠;刘元杰;姚文生;张一帜;魏津;马欣;王甲;冯妍;赵浩然;刘燕;朱良全;
本试验旨在基于血球计数板法探究影响球虫卵囊计数准确性的因素，评价相关因素对结果准确性的影响程度，从而对目前广泛应用的球虫活疫苗卵囊计数方法进行改进。试验中对比不同放大倍数视野、不同生产厂家血球计数板、不同球虫孢子化卵囊浓度和助悬剂对球虫卵囊计数结果准确性的影响。结果显示，视野放大倍数、血球计数板、球虫孢子化卵囊浓度和助悬剂对球虫卵囊计数结果均有一定影响，其中，视野放大倍数有显著影响。添加助悬剂，调整样品球虫孢子化卵囊数量至181～343个/0.4μL，用改良Neubauer血球计数板在10×20倍显微镜下进行计数，结果较为准确，连续6次计数结果的变异系数基本控制在20%以内。结果表明，限定视野放大倍数、血球计数板和球虫孢子化卵囊浓度及添加助悬剂，可有效降低球虫卵囊计数结果的变异系数，提高计数结果的准确性，降低人员误差，为《中华人民共和国兽药典》改版修订提供了试验依据和理论参考。
2025年03期 v.61 74-80页 [查看摘要][在线阅读][下载 1154K] [下载次数：130 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 赵增成;刘在青;肖建森;林树乾;衣云鹏;刘月月;殷斌;杨世发;张荣岭;宋士凯;闫遵祥;黄中利;王海挺;郭丽华;
为了克服氟苯尼考水溶性差、生物利用度低和不能饮水给药的缺点，本试验以氟苯尼考为主药，以β-环糊精为辅料，采用环糊精包合技术和喷雾干燥方法，进行了氟苯尼考包合微囊的研制，并对制备的成品进行了溶解性比对试验、溶出度比对试验、稳定性试验和药代动力学试验。结果显示，成功制备出了氟苯尼考环糊精包合微囊，收率为99.6%,15 min溶出度高达93%，产品质量稳定，口服给药后血药浓度达峰时间为1.44 h，峰浓度为15.32μg/mL。结果表明，本方法所制备的氟苯尼考产品水溶性好，体内吸收速度快，血药浓度高，工艺切实可行，已实现产业化生产，可显著提升企业的产品竞争力。
2025年03期 v.61 81-85页 [查看摘要][在线阅读][下载 1214K] [下载次数：118 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ] - 张昌盛;马春湘;田恒玖;刘燕;董玉兰;
北京雨燕是北京市重点保护野生动物，为研究北京雨燕小肠的肠道组织学结构特点，本试验运用苏木精-伊红（H.E.）染色和阿利新蓝-过碘酸雪夫（AB-PAS）染色对北京雨燕十二指肠、空肠和回肠的组织结构进行观察，并统计各肠段肠绒毛高度、黏膜厚度、绒毛宽度、隐窝深度和肌层厚度，计算绒毛高度与隐窝深度的比值（V/C）和小肠杯状细胞数量。结果显示，北京雨燕小肠各肠道由内向外依次为黏膜层、黏膜下层、肌层和浆膜层，小肠各肠段均无中央乳糜管，十二指肠黏膜下层无十二指肠腺；十二指肠绒毛高度极其显著高于空肠（P <0.001）和回肠（P <0.001），黏膜厚度显著高于空肠（P <0.05）和回肠（P <0.05）,V/C显著高于回肠（P <0.05）；回肠绒毛宽度极其显著小于十二指肠（P <0.001）和空肠（P=0.001），回肠隐窝深度和肌层厚度均极其显著高于十二指肠（P <0.001）和空肠（P <0.001）；小肠杯状细胞数量从十二指肠到回肠呈显著上升趋势，且3段肠段之间差异均极其显著（P <0.001）。本试验为进一步研究北京雨燕肠道的发育特征以及肠道疾病的诊断和预防提供基础数据。
2025年03期 v.61 86-90页 [查看摘要][在线阅读][下载 2449K] [下载次数：87 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：0 ]