- 吴海军;李好;崔超文;李村院;刘开平;戴继鸿;倪伟;胡圣伟;
产甲烷古菌在反刍动物生理健康中具有重要作用，反刍动物瘤胃产甲烷过程不仅影响反刍动物的能量代谢和饲料利用率，还与温室气体排放密切相关，为了探究噬菌体对瘤胃产甲烷过程是否有影响，本试验将组装得到的瘤胃产甲烷相关噬菌体编码的辅助代谢基因mtaA进行生物信息学分析、原核表达和蛋白纯化，并通过紫外分光光度法测定MtaA的辅酶M(CoM）依赖性甲钴胺[CH_3Cob（Ⅲ）]的甲基转移。生物信息学分析结果显示，瘤胃产甲烷相关噬菌体来源的MtaA蛋白与甲烷古菌相似，由Zn~(2+)及其配体共同组成蛋白活性中心，预示着噬菌体来源的MtaA蛋白可能也具有转移甲基的生物学活性；系统发育分析结果显示，噬菌体来源的MtaA蛋白与甲烷杆菌科古菌属来源的MtaA序列相似性为99.7%，推测噬菌体来源的mtaA基因最初可能是由甲烷杆菌科转移并整合到噬菌体基因组中；本试验成功构建了pET-24a(+)-mtaA重组质粒，纯化获得MtaA蛋白；生物活性检测结果显示，当反应体系中MtaA蛋白浓度达到50 mg/mL时，520 nm处测定的吸光度值显著降低（P=0.013）。结果表明，瘤胃产甲烷相关噬菌体来源的MtaA具有转移甲基的生物活性，噬菌体在调控微生物群落中的作用可能为防控动物肠道病原菌提供新的思路，对保障动物健康和食品安全具有重要意义。
2025年06期 v.61 1-10页 [查看摘要][在线阅读][下载 2768K] [下载次数：30 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：21 ] - 王艳萍;王文秀;徐倩倩;王艳;莫玲;苗立中;董林;杨丽梅;郭时金;付石军;田风荣;
为了开发增强黏膜免疫的CpG寡脱氧核苷酸（CpG-ODN）纳米剂，为减抗和替抗提供支撑。本试验采用多碳纳米管（MWCNT）制备CpG-ODN纳米剂，经肺内途径免疫新生海兰W-36白壳蛋鸡，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清白细胞介素2(IL-2)、干扰素γ(IFN-γ)和肠道分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量，荧光定量逆转录聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素8(IL-8)、白细胞介素10(IL-10)、白细胞介素18(IL-18)和Toll样受体21(TLR21)的mRNA转录水平。通过生存率、临床赋值评分和细菌接种评分评价CpG-ODN纳米剂对禽致病性大肠杆菌O_2的攻毒保护效力。结果显示，制备的CpG-ODN纳米剂平均粒径为（72.30±9.54）nm，形态均一。与对照组比较，CpG-ODN组鸡只血清中IL-2和IFN-γ在12和24 h极显著升高（P <0.01）;IL-1β、IL-6、IL-18、IL-4和TLR21mRNA转录水平在12和24 h显著增加（P <0.05或P <0.01）;IL-10 mRNA转录水平在6 h极显著增加（P <0.01）,12 h显著增加（P <0.05）；肠道sIgA在12和24 h显著升高（P <0.05），在48 h极显著升高（P <0.01）。与攻毒对照组相比，CpG-ODN组和抗生素组鸡只生存率均显著升高（P <0.05），临床赋值评分和细菌接种评分均显著降低（P <0.05）。结果表明，肺内给予CpG-ODN纳米剂可激活黏膜免疫反应，有效保护禽致病性大肠杆菌O_2对试验鸡只的攻击，明显减轻临床症状并降低死亡率，显示良好的减抗和替抗前景。
2025年06期 v.61 11-18页 [查看摘要][在线阅读][下载 2543K] [下载次数：33 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：10 ] - 程思颖;刘耀权;童晓芳;黎玉琼;高健;
为研究我国西北地区奶牛隐性乳房炎的发病规律及相关影响因素，本试验对西北地区4个规模化奶牛场检测出的267头隐性乳房炎奶牛的胎次、泌乳阶段和感染乳区等信息进行统计与分析，同时无菌采集患病乳区的乳样，进行病原菌的分离培养和鉴定。结果显示，在隐性乳房炎患病奶牛中，经产牛的比例（80.52%,215/267）远高于头胎牛（19.48%,52/267）；在患病头胎牛和经产牛中，泌乳高峰期奶牛的发病比例较高，分别为53.85%(28/52)和69.77%(150/215)；奶牛的前乳区更易感染隐性乳房炎；病原菌分布的分析结果显示，凝固酶阴性葡萄球菌是主要致病菌，其次为大肠杆菌、肺炎克雷伯菌和停乳链球菌；不同牧场的病原菌分布存在显著差异（χ~2=62.21,P <0.01）；在头胎牛和经产牛中，凝固酶阴性葡萄球菌和大肠杆菌的检出率均较高，不同胎次患病奶牛的病原菌类型无显著差异（χ~2=0.68,P=0.57）；在不同泌乳阶段的患病奶牛中，凝固酶阴性葡萄球菌的分布比例最高（泌乳早期、泌乳高峰期和泌乳后期分别为25.00%、27.53%和27.87%），不同泌乳阶段患病奶牛的病原菌类型无显著差异（χ~2=10.53,P=0.84）；凝固酶阴性葡萄球菌在前后乳区的分布比例均最高（分别为29.87%和23.89%），患病奶牛不同感染乳区的病原菌类型无显著差异（χ~2=9.57,P=0.30）。结果提示，应加强对奶牛泌乳高峰期和经产牛的卫生管理，并在干奶期采取有效的治疗措施，以降低隐性乳房炎的发病率，进而提升奶牛健康水平和牧场经济效益。本调查明确了西北地区奶牛隐性乳房炎的发病规律及其病原菌分布特点，揭示了胎次、泌乳阶段、感染乳区和牛群特征对发病的影响，为该地区奶牛隐性乳房炎的综合防控提供了重要的科学依据。
2025年06期 v.61 19-26页 [查看摘要][在线阅读][下载 1197K] [下载次数：57 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：15 ] - 李梦涵;李子怡;韩天惠;邵子益;计红;
为探究桑色素对冷刺激小鼠心脏、肺脏、肾脏、脾脏病理组织学变化的影响，本试验将C57BL/6小鼠随机分为6个组，常温对照组（Control组）和桑色素对照组（MO组）小鼠室温饲养，冷刺激组（Cold组）和低（Cold+LMO）、中（Cold+MMO）、高（Cold+HMO）剂量桑色素治疗组小鼠每天灌胃桑色素1 h后于4℃饲养3 h，试验重复3周后，采集各组小鼠心脏、肺脏、肾脏、脾脏组织，检测各器官重量和内脏器官指数，然后制作组织切片，进行组织病理学观察。结果显示，与Control组相比，MO组小鼠心脏、肺脏、肾脏、脾脏的外观、重量和指数均无明显变化（P> 0.05）,Cold组小鼠心脏、肺脏、肾脏、脾脏重量和指数极显著升高（P <0.01或P <0.001），心脏、肺脏外观出现充血现象，脾脏、肾脏外观出现明显的出血斑；与Cold组相比，Cold+LMO、Cold+MMO、Cold+HMO组小鼠的心脏、肺脏、肾脏、脾脏重量和指数均显著降低（P <0.05或P <0.01或P <0.001），且各内脏器官出血点或出血斑减少，充血现象明显减轻。与Control组相比，MO组小鼠各内脏器官组织损伤评分无显著差异（P> 0.05）,Cold组心脏、肺脏、肾脏、脾脏损伤评分极其显著升高（P <0.001）；与Cold组相比，Cold+LMO、Cold+MMO、Cold+HMO组小鼠的各内脏器官损伤评分均显著降低（P <0.05或P <0.01或P <0.001）。结果表明，桑色素能有效缓解冷刺激诱导所致小鼠心脏、肺脏、肾脏、脾脏损伤。本试验结果可为桑色素作为新型抗应激饲料添加剂的开发提供重要参考和借鉴。
2025年06期 v.61 27-38页 [查看摘要][在线阅读][下载 4184K] [下载次数：21 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：11 ] - 唐美慧;Areej Arif;董理月;于海亮;汤建强;范作堃;张涛;张跟喜;谢恺舟;赵振华;戴国俊;
为了探究柔嫩艾美耳球虫（Eimeria tenella）感染后不同球虫抗性鸡群体对免疫、氧化应激反应和炎症相关基因表达量的影响，本试验将京海黄鸡随机分为对照组和攻毒组，根据柔嫩艾美耳球虫感染后的相对增重率、粪便卵囊数、卵囊值、盲肠病变值和抗球虫指数等抗性评价指标，筛选出抗性组和易感组鸡群体，测定柔嫩艾美耳球虫感染后不同球虫抗性鸡群体血液炎性因子和抗氧化指标以及不同组织中炎性相关基因的表达量。结果显示，抗性组和易感组血液中超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性及活性氧（ROS）浓度与对照组相比差异极显著（P <0.01），但不同球虫抗性组间血液中SOD和CAT活性及ROS和一氧化氮（NO）浓度无显著差异（P> 0.05）；抗性组和易感组血液中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)浓度极显著高于对照组（P <0.01），且易感组IL-1β和TNF-α浓度极显著高于抗性组（P <0.01）；抗性组和易感组盲肠和胸腺中IL-6、IL-8、IL-1β和TNF-α基因表达量极显著高于对照组（P <0.01），且易感组盲肠和胸腺中IL-1β、TNF-α基因表达量极显著高于抗性组（P <0.01）。抗性组与易感组之间进行比较发现，2个组血液中IL-1β和TNF-α浓度与盲肠和胸腺组织中IL-1β和TNF-α基因表达量的变化规律高度一致。结果表明，柔嫩艾美耳球虫感染促进了不同球虫抗性鸡群体免疫、氧化应激反应和炎症相关基因表达量。
2025年06期 v.61 39-46页 [查看摘要][在线阅读][下载 1942K] [下载次数：32 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：14 ] - 韩元;李春花;李志;林伟山;马豆豆;蔡进忠;雷萌桐;
为了解青海省部分地区牦牛感染中华泰勒虫情况，本试验从青海省6个州市10个县市共采集411份牦牛血液样本，提取其血液基因组DNA，采用巢式PCR方法扩增梨形虫18S rRNA基因V4高变区并测序分析，应用DnaSP v6软件分析阳性样本的单倍型数量、突变位点、单倍型多样性和核苷酸多样性，应用PopArt和MEGA 6.0软件构建阳性样本的单倍型网络图和系统发育树。结果显示，牦牛血液样本中中华泰勒虫感染率为19.46%(80/411)，且中华泰勒虫阳性样本的18S rRNA序列共有16个单倍型，主要以中华泰勒虫单倍型1(TsH1)为主（65/80），在海晏县、河南县、达日县、贵南县和玉树市均有分布，而其余15个单倍型各占1.25%(1/80)，只在贵南县分布；单倍型多样性指数为0.342，核苷酸多样性指数为0.002 53，共有25个突变位点。系统发育分析结果显示，中华泰勒虫16个单倍型与GenBank中已发表的中华泰勒虫甘肃株、武汉株、海南株、新疆株和河南株序列聚为一支。本试验可为青海省蜱传中华泰勒虫病的防控提供数据支撑。
2025年06期 v.61 47-52页 [查看摘要][在线阅读][下载 1503K] [下载次数：35 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：7 ] - 胡盼;陈旭芳;王晓蕾;李玄;刘伟;蔡鹏;曾建国;
为了鉴定造成湖南省长沙市某黄羽肉鸡养殖场6周龄肉鸡死亡的鸡球虫种类，本试验采用饱和食盐水漂浮法和单卵囊分离技术，从病死鸡的粪便和盲肠内容物中成功分离出1株球虫，通过观察该虫株卵囊的形态和大小，初步鉴定其种类。通过聚合酶链式反应（PCR）技术进一步确定了该球虫的种类，随后检测了该虫株的潜隐期、裂殖体寄生部位和大小、致病力和最短孢子化时间，明确其生物学特性。结果显示，该球虫寄生于盲肠，卵囊平均大小为22.2μm×19.0μm，卵囊指数为1.17；对PCR扩增产物进行测序，比对分析核苷酸同源性，结果显示，该虫株与GenBank中登录的7株柔嫩艾美耳球虫（E. tenella）的同源性为96.44%～100%，将其命名为E. tenella-TCS2404-01；生物学特性鉴定结果显示，该虫株潜隐期为124 h，最短孢子化时间为16 h，接种1.2×10~4个卵囊/羽的分离虫株可导致鸡只相对增重率下降至73.8%，平均肠道病变评分达到3.7分，死亡率达到30%。结果表明，本试验分离出1株致病力较强的E. tenella虫株，该发现对于了解湖南省鸡球虫病的流行情况及其防控具有重要意义，为未来针对该虫株的疫苗研发和药物开发提供了基础信息。
2025年06期 v.61 53-59页 [查看摘要][在线阅读][下载 1610K] [下载次数：29 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：8 ] - 刘玲;戴伶俐;李晓艳;付玲芳;康斌;董鹏;武玉梅;尹忠良;吴蒙;李雪峰;
为实现对口蹄疫病毒（FMDV）类病毒颗粒（VLPs）疫苗免疫效果的有效评估，建立一种O型FMDV VLPs疫苗抗体竞争酶联免疫吸附测定（ELISA）检测方法。本试验以O型FMDV VLPs作为免疫原免疫小鼠制备单克隆抗体，通过O型FMDV VLPs和O型FMDV灭活疫苗抗原筛选，ELISA四参数拟合曲线判定，确定最佳单抗。将O型FMDV VLPs作为包被抗原，辣根过氧化物酶（HRP）标记特异性单抗与被检血清竞争结合，通过优化确定O型FMDV VLPs最佳包被浓度、HRP标记特异性单抗最佳工作浓度和最适封闭液，经计算确定判定标准，并进一步分析该竞争ELISA方法的敏感性和特异性；采用建立的方法检测90份O型FMDV VLPs疫苗免疫猪血清样品，验证其实用性。结果显示，O型FMDV VLPs特异性单抗为1D3单抗，该竞争ELISA检测方法的最佳工作条件为：O型FMDV VLPs最佳包被浓度为0.2μg/mL,HRP标记1D3单抗最佳工作浓度为1∶1 000，最适封闭液为1%明胶。竞争ELISA判定标准为：被检血清阻断率≥40%，判为阳性；被检血清阻断率≤32%，判为阴性；被检血清阻断率介于32%～40%，则应在14 d后对动物进行重新检测。敏感性和特异性试验结果显示，建立方法的最低检测限为血清效价1∶1 000，仅有O型FMDV VLPs疫苗免疫阳性血清能发生竞争性结合，O型和A型FMDV灭活疫苗免疫猪阳性血清无竞争性结合。90份O型FMDV VLPs疫苗免疫猪血清样品的阻断率结果符合体液免疫应答的一般规律，证明该方法可以有效评估O型FMDV VLPs疫苗免疫后血清抗体水平。本试验建立的FMDV VLPs疫苗抗体竞争ELISA检测方法可为开发更多VLPs疫苗检测技术提供技术支撑。
2025年06期 v.61 60-66页 [查看摘要][在线阅读][下载 1340K] [下载次数：61 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：13 ] - 张燕;冀伟;程阳颖;邓梦梦;李世杰;陈国庆;谢等龙;曹兴元;
为分析阿莫西林克拉维酸钾片受试制剂和参比制剂在犬体内的药动学特征和生物等效性，本试验选取24只健康金毛寻回犬并随机分成2个组，采取随机单剂量、双周期、双处理、双序列的交叉试验设计，分别交叉口服受试和参比制剂，剂量为25 mg（/kg·bw），于给药前（0 h）以及给药后的0.083、0.25、0.5、0.75、1、1.25、1.5、1.75、2、2.5、3、4、6、8和12 h采集臂头静脉血。验证超高效液相色谱串联质谱（UPLC-MS/MS）的线性范围、特异性、检测限和定量限、准确度和精密度、基质效应和稳定性后，采用UPLC-MS/MS检测受试动物血浆中的阿莫西林和克拉维酸，并使用WinNonlin 8.1软件计算分析主要的药动学参数达峰浓度（C_(max)）、达峰时间（T_(max)）和药时曲线下面积（AUC_(0-t)和AUC_(0-∞)），从而评价受试和参比制剂的生物等效性。结果显示，UPLC-MS/MS在阿莫西林和克拉维酸对应的线性浓度范围内（20～5 000 ng/mL和50～2 000 ng/mL）线性关系良好，相关系数均≥0.99；特异性良好；阿莫西林的检测限和定量限分别为10和20 ng/mL，克拉维酸的检测限和定量限分别为20和50 ng/mL；阿莫西林平均回收率为89.88%～111.64%，精密度结果良好，克拉维酸平均回收率为94.00%～114.48%，精密度结果良好；基质效应均符合要求；阿莫西林和克拉维酸在空白血浆中的稳定性良好。受试制剂和参比制剂的药时曲线基本一致，受试和参比制剂中阿莫西林的T_(max)分别为（2.34±0.74）和（2.13±0.59)h,C_(max)分别为（8.88±2.43）和（9.00±2.25）μg/mL,AUC_(0-t)分别为（38.22±9.05）和（37.44±9.51）（μg/mL）·h,AUC_(0-∞)分别为（39.23±9.17）和（38.07±9.69）（μg/mL）·h；受试和参比制剂中克拉维酸的T_(max)分别为（1.31±0.36）和（1.27±0.28)h,C_(max)分别为（2.36±0.78）和（2.71±1.37）μg/mL,AUC_(0-t)分别为（5.47±1.30）和（5.19±2.00）（μg/mL）·h,AUC_(0-∞)分别为（5.73±1.16）和（5.33±1.98）（μg/mL）·h。经生物等效性统计分析，受试和参比制剂阿莫西林C_(max)、AUC_(0-t)和AUC_(0-∞)几何均数对数转换的比值分别为98.20%、102.73%和103.81%，受试和参比制剂克拉维酸C_(max)、AUC_(0-t)和AUC_(0-∞)几何均数对数转换的比值分别为90.44%、109.05%和111.67%,90%置信区间介于80.00%～125.00%，符合生物等效性研究技术指导原则。结果表明，2种制剂生物等效，在临床上可以相互替代，为宠物临床用药提供参考。
2025年06期 v.61 67-74页 [查看摘要][在线阅读][下载 1344K] [下载次数：36 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：15 ] - 楚天舒;杨宇辰;陆远;戴子扬;赵智强;贺雪妮;蒲胜海;吴湘琳;马兴旺;汤树生;
针对畜禽粪肥中雌激素引发农田土壤生态污染风险的问题，本试验以北大荒集团和新疆生产建设兵团的种养业为研究对象，根据雌激素在种养业间的流动规律，运用物质流分析法和风险商法，以雌激素生态风险值为阈值，优化获得每公顷农田适宜承载的畜禽养殖量。结果显示：（1）北大荒集团每公顷农田分别可承载409.7头生猪、11.0头奶牛、30.7头肉牛、346.5羽蛋鸡和1 921.0羽肉鸡；新疆生产建设兵团每公顷农田分别可承载435.0头生猪、11.5头奶牛、54.2头肉牛、394.0羽蛋鸡和2 684.8羽肉鸡。双酚A为主要限制畜禽粪肥施用的雌激素种类，而17α-炔雌醇基本不限制粪肥施用。（2）优化畜禽粪便处理技术参数，提高粪便中双酚A的降解率，是未来保障粪肥安全施用和土壤健康的重要措施。本试验可为区域种养结合和土壤环境保护提供参考案例。
2025年06期 v.61 75-82页 [查看摘要][在线阅读][下载 1889K] [下载次数：9 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：9 ]