- 佟琪;李泉霖;付梓正;屈亚锦;张钰琪;毛润城;俞理葳;付元元;马志东;曹熙昊;孙洪磊;刘金华;
2025年10月以来，华东地区多个省份陆续出现鸡群疑似禽流感发病案例，发病鸡品种包括黄羽肉鸡、白羽肉鸡和产蛋鸡，临床主要表现为严重呼吸道症状，产蛋鸡出现急性产蛋量下降。本研究对2个典型发病鸡场开展病原分离鉴定和基因遗传进化分析，并进行动物回归试验。结果显示，从发病鸡场分离获得2株毒株，分别为H6N2和H6N1亚型禽流感病毒（AIV）；基因进化分析结果显示，2株分离株均为新型重配病毒，由ST339-like谱系水禽源H6亚型AIV与鸡源G57基因型H9N2亚型AIV基因重配产生。动物回归试验结果显示，2株新型重配病毒对无特定病原体（SPF）产蛋鸡具有高度适应性，感染鸡表现出典型呼吸道症状和产蛋量下降，可通过口咽和泄殖腔途径排毒，最长排毒持续时间达8 d；脏器病毒滴度检测发现，病毒在呼吸系统和眼睑组织中高效复制，在部分感染鸡的输卵管和肾脏组织中也可实现高水平复制。病毒传播性试验结果显示，H6N2和H6N1亚型分离株均能在SPF蛋鸡群中实现高效接触传播，其中，H6N2亚型毒株还具备一定的鸡群内空气传播能力。结果表明，携带H9N2亚型AIV内部基因的新型重配H6亚型AIV对鸡的适应性显著增强，且具有扩散风险，需开展针对性流行病学监测工作，建立科学有效的防控体系，防范疫情进一步蔓延，保障禽类养殖产业健康发展。
2026年03期 v.62 1-13页 [查看摘要][在线阅读][下载 5407K] [下载次数：262 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：79 ] - 韩俊伟;刘智华;黄小东;张启顺;苏玉贤;
为了查明河南省南阳市宛城区某羊场病死山羊的致病菌及其病原特性，本试验采集病死山羊肝脏、肺脏等病料，分离培养细菌，通过16S rDNA基因测序和遗传进化分析鉴定分离菌株的种属，通过PCR检测毒素基因确定其分型，对分离菌株进行多位点序列分型（MLST）、全基因组测序和遗传进化分析、单核苷酸多态性（SNP）分析，根据毒力因子数据库（VFDB）和综合抗生素耐药基因数据库（CARD）预测分离菌株的毒力基因和耐药基因；运用K-B琼脂纸片法检测分离菌株对12种抗菌药物的敏感性，并通过小鼠感染试验分析其致病性。结果显示，分离鉴定得到1株A型产气荚膜梭菌（命名为WC202409）。全基因组遗传进化分析结果显示，该菌株与俄罗斯源产气荚膜梭菌（C. perfringens）QDAF01亲缘关系较近。SNP分析结果显示，分离菌株与我国菌株1718G、QHY-2、XZ-D1、ZWCP079的SNP差异数很小。VFDB注释到11种毒力因子和16种与产气荚膜梭菌相关的基因；CARD注释到6类抗生素14种耐药基因。药敏试验结果显示，分离菌株WC202409对四环素、头孢唑林、苯唑西林、青霉素G、链霉素和氟苯尼考耐药，对头孢噻肟、恩诺沙星、头孢曲松和亚胺培南敏感。小鼠致病性试验结果显示，试验组小鼠感染分离菌株5 d后全部死亡，剖检可观察到明显病变，经验证，致病菌为WC202409。结果表明，WC202409分离菌株为该羊群致病菌，对多种药物耐药，致病力强，可能来源于常年跨境贩运传播。本试验结果有助于产气荚膜梭菌病防控以及病原体和商业疫苗研究。
2026年03期 v.62 14-24页 [查看摘要][在线阅读][下载 2200K] [下载次数：163 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：36 ] - 周志新;姜鑫;万珈旭;苑庆欣;杨书博;宋军;
为应对科氏葡萄球菌（S. cohnii）日益加重的感染风险和耐药性威胁，本试验以科氏葡萄球菌为宿主菌，从污水中分离科氏葡萄球菌噬菌体并进行形态观察，测定其最佳感染复数（MOI）、一步生长曲线、稳定性生物学特性；提取噬菌体基因组并进行全基因组测序分析，通过Virulence Factors和ResFinder数据库比对是否存在毒力因子和抗生素抗性基因；采用平板计数法评价噬菌体对浮游菌的裂解作用和对细菌生物被膜的清除能力，采用结晶紫染色法评价噬菌体对细菌生物被膜胞外聚合物的清除能力。结果显示，本试验分离到1株科氏葡萄球菌噬菌体，命名为vB＿ScoM-YCP，噬菌斑直径1.0～1.5 mm，透亮，形状规则且有半透明的晕环，其最佳MOI为0.01，潜伏期为15 min，爆发期为35 min，能够在pH 4.0～9.0、20～40℃环境中生存，且可耐受1%三氯甲烷。基因组学分析结果显示，噬菌体vB＿ScoM-YCP(GenBank登录号：PQ801475.1)不含毒力基因和耐药基因。vB＿ScoM-YCP在2 h时即可极显著降低科氏葡萄球菌浮游菌数量（P<0.01），在72 h内可裂解89.69%生物被膜内菌体，对成熟生物被膜胞外聚合物的清除率可达63.80%。结果表明，本试验分离的噬菌体vB＿ScoM-YCP能够裂解科氏葡萄球菌，并对其生物被膜具有显著的裂解活性和清除作用，丰富了科氏葡萄球菌噬菌体资源库。
2026年03期 v.62 25-33页 [查看摘要][在线阅读][下载 2576K] [下载次数：122 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：29 ] - 李美艳;吕蓉蓉;杨敏;葛琪;李娜;张椰莉;乔宏萍;武晓英;
本试验旨在基于NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)炎症小体探究氟暴露对小鼠抑郁样行为的分子机制。将60只C57BL/6J小鼠随机分为4个组：对照组、25 mg/L氟暴露组、50 mg/L氟暴露组和100 mg/L氟暴露组，对照组饮用蒸馏水，3个氟暴露组分别饮用含相应剂量氟化钠的蒸馏水。90 d后，每组取6只小鼠进行行为学试验（强迫游泳试验和悬尾试验），观察小鼠是否有抑郁样行为，随后伊文思蓝法进行血脑屏障破坏定量分析试验，苏木精-伊红（H. E.）染色观察小鼠海马组织病理学变化，酶联免疫吸附试验（ELISA）检测色氨酸-犬尿氨酸代谢变化，实时荧光定量聚合酶链式反应（qPCR）检测小鼠脑组织抑郁相关基因、炎症因子和NLRP3炎症小体相关因子的mRNA相对表达量，最后将所有指标进行皮尔逊相关性分析。结果显示，与对照组相比，100 mg/L氟暴露可显著诱导小鼠发生抑郁样行为（P<0.05）;50和100 mg/L氟暴露组小鼠脑组织中伊文思蓝含量极显著升高（P<0.01或P<0.001），血脑屏障被破坏；3个氟暴露组小鼠海马阿蒙氏角1(CA1)、阿蒙氏角2(CA2)、阿蒙氏角3(CA3)和齿状回（DG）区出现不同程度的神经元排列紊乱，细胞间隙增大，细胞核固化萎缩、染色加深，核膜模糊不清。与对照组相比，50和100 mg/L氟暴露可显著增加吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）活性和犬尿氨酸（KYN）含量，降低色氨酸（TRP）和5-羟色胺（5-HT）含量（P<0.05或P<0.01或P<0.001），导致色氨酸-犬尿氨酸代谢紊乱；极显著下调抑郁相关基因脑源性神经营养因子（BDNF）、谷氨酸脱羧酶67(GAD67)和囊泡γ-氨基丁酸转运体（VGAT）的mRNA表达（P<0.01或P<0.001），显著上调炎症因子白细胞介素-18(IL-18)和干扰素-γ(IFN-γ)的mRNA表达（P<0.05或P<0.01）；此外，100 mg/L氟暴露可极显著上调NLRP3炎症小体相关因子NLRP3、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)和凋亡相关斑点样蛋白（ASC）的mRNA表达（P<0.01或P<0.001）。相关性分析结果显示，NLRP3炎症小体与其余各指标均呈显著性相关关系（P<0.05或P<0.01或P<0.001）。综上所述，氟暴露可引起小鼠抑郁样行为，其可能与NLRP3介导的神经炎症和色氨酸-犬尿氨酸代谢紊乱相关。
2026年03期 v.62 34-43页 [查看摘要][在线阅读][下载 2802K] [下载次数：134 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：32 ] - 艾丽双;杜秋明;房琳琳;张锋;郑辉;王英丽;王志亮;李林;包静月;李海峰;
为了建立一种简便可靠的牛结节性皮肤病病毒（LSDV）全基因组测序（WGS）方法，以便及时掌握LSDV毒株流行情况。本试验根据参考文献设计并优化23对LSDV中央区域序列的扩增子引物，以及1对基因组5′和3′末端的扩增子引物，确保能够覆盖病毒全基因组序列。将PCR扩增产物经1%琼脂糖凝胶电泳验证后进行Nanopore测序，使用生物信息学软件对测序数据进行组装和分析，通过二代测序验证Nanopore测序方法的准确性。为了识别4份样品所获得LSDV毒株的祖先并揭示它们之间的亲缘关系，将组装后的全基因组序列与49条代表性LSDV全基因组序列进行多序列比对，构建基于WGS的系统发育树。结果显示，本试验成功使用PCR扩增结合Nanopore测序技术建立了针对LSDV的WGS方法。该方法从4份LSDV阳性样品中获得的LSDV基因组测序覆盖度均超过96.00%，与二代测序结果一致性皆能达到99.99%。该方法在测序深度较低时仍能完成基因组组装，且在基因组的重复序列和结构变异中表现出明显优势。经全基因组系统发育分析，所获得的4株毒株序列均属于Clade 2.5。结果表明，本试验成功建立了基于扩增子的LSDV全基因组Nanopore测序方法，该方法具有操作简便、结果可靠的优势，可为当前我国牛结节性皮肤病（LSD）防控和分子流行病学研究提供技术支持。
2026年03期 v.62 44-53页 [查看摘要][在线阅读][下载 1739K] [下载次数：92 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：31 ] - 孟卫芹;董林;宋晶晶;魏凤;付强;王长江;郭时金;王金良;
为建立一种快速检测羊血清中布鲁氏菌抗体的免疫层析方法，本试验以荧光微球作为标记物偶联布鲁氏菌重组外膜蛋白BP26，将BP26蛋白及其单克隆抗体1D10分别喷涂于硝酸纤维素膜的检测线和质控线，优化反应条件组装荧光微球试纸条，并评价其特异性、敏感性和重复性；将该方法对184份临床羊血清样品的检测结果与布鲁氏菌竞争酶联免疫吸附试验（cELISA）抗体检测试剂盒的检测结果进行对比。结果显示，荧光微球偶联物的最佳复溶倍数为200倍，检测线最佳包被浓度为0.6 mg/mL，最佳反应时间为15 min；该试纸条与曼氏杆菌、沙门菌、小肠耶尔森菌、小反刍兽疫病毒和口蹄疫病毒阳性血清均无交叉反应；检测布鲁氏菌阳性血清标准品的最大稀释度为1∶800；批内和批间变异系数均小于10%；使用该试纸条检测临床样品的结果与布鲁氏菌cELISA试剂盒检测结果的总体符合率为92.4%。结果表明，本试验所制备的布鲁氏菌荧光微球免疫层析试纸条特异性强、灵敏度高、快速稳定、结果准确且成本低，可用于布鲁氏菌抗体临床快速筛查和流行病学调查。
2026年03期 v.62 54-59页 [查看摘要][在线阅读][下载 1255K] [下载次数：102 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：29 ] - 黄孟锟;闫昊;张研博;张皓博;张培培;孙翔翔;樊晓旭;
虫媒病毒经节肢动物传播，对人类健康和畜牧业生产构成威胁。为了解新疆与云南地区独特的地理和气候条件下虫媒病毒的多样性，并对其进行监测。本试验采用高通量测序（HTS）结合生物信息学方法，对新疆维吾尔自治区精河县和温泉县养殖场的蜱虫样本，以及云南省大理白族自治州养殖场的蚊子、苍蝇、白蛉样本开展宏病毒组学分析。结果显示，在204个节肢动物样本中，共鉴定到26个病毒科/目，35条完整或近乎完整病毒Contigs，包含8个脊椎动物相关病毒科，其中有5条Contigs与非冗余蛋白序列（NR）数据库中所有已注释病毒的病毒RNA依赖的RNA聚合酶（RdRp）编码区氨基酸序列的最高同源性均低于90%。云南省大理白族自治州蚊子样本的病毒多样性和丰度最高，以弹状病毒科（Rhabdoviridae）和中套病毒科（Mesoniviridae）为主，新疆维吾尔自治区的蜱虫样本中则以布尼亚病毒目（Bunyavirales）和楚病毒科（Chuviridae）为主。云南省蚊子样本中检出的南定（Nam dinh）病毒与越南脑炎患者以及深圳市和云南省检出的该病毒同源性极高（大于97%或99%）。系统发育分析结果显示，部分新发现病毒与未分类病毒形成独立分支，可能为潜在新病毒属。结果表明，新疆和云南地区养殖场节肢动物所携带的病毒不仅具有丰富的遗传多样性，还存在潜在新病毒属和跨宿主传播风险。本试验结果可为保障畜牧业生产安全和公共卫生安全提供科学依据。
2026年03期 v.62 60-66页 [查看摘要][在线阅读][下载 1858K] [下载次数：39 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：28 ] - 邓成成;陈煌亮;祁瑞;
为了解青海省门源地区高原鼠兔（Ochotona curzoniae）体内人兽共患病原微生物的携带情况，并加深对青藏高原高海拔生态系统中高原鼠兔潜在病原携带特征的认识。本试验在青藏高原北部的门源县捕获60只高原鼠兔，分别采集其脾脏、肺脏和肠道内容物提取DNA，采用聚合酶链式反应（PCR）结合一代测序技术对多种病原微生物进行分子检测，并进行基因序列比对和系统发育分析。结果显示，布鲁氏菌检出率为3.3%(2/60)，隐球菌为10.0%(6/60)，毛霉菌为3.3%(2/60)，艾美耳球虫为65.0%(39/60)，囊孢球虫为10.0%(6/60)，而耶尔森菌和弓形虫均未检出（0/60）。进一步鉴定结果显示，布鲁氏菌为根际布鲁氏菌，隐球菌为大隐球菌和浅白隐球菌，毛霉菌为总状毛霉，囊孢球虫为赖氏囊孢球虫，而艾美耳球虫表现出较高的遗传多样性，包括3个独立的进化支和1个与Eimeria banffensis同源的进化支。结果表明，高原鼠兔体内可携带多种人兽共患病原体，具有潜在的传播风险，可能对人类健康构成威胁。本试验结果可为西北地区人兽共患疾病的传播机制研究和防控策略制定提供重要的科学依据。
2026年03期 v.62 67-75页 [查看摘要][在线阅读][下载 1878K] [下载次数：61 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：25 ] - 吕志远;李欣;罗雅洁;刘丹;张紫彤;赵智香;韩燕茹;王金玲;呼和巴特尔;特木热;刘瑞军;王文龙;高娃;
为分离鉴定内蒙古地区的山羊支原体山羊肺炎亚种（Mccp）并提高Mccp在液体培养基中的生长浓度，本试验对内蒙古巴彦淖尔及周边地区的43份疑似山羊传染性胸膜肺炎（CCPP）样品进行分离培养和形态学观察；通过基因扩增和序列分析将待测支原体分离株鉴定至亚种水平；通过颜色改变单位（CCU）法和聚合酶链式反应（PCR），基于初始pH和培养基成分的调整，获得有效提高Mccp生长浓度的条件。结果显示，分离、纯化获得5株单菌落，光学显微镜下观察菌落形态呈典型的乳头状；基因扩增和序列分析结果显示，内蒙古巴彦淖尔及周边地区引起山羊支原体肺炎的主要病原为Mccp，该分离株与甘肃的M1601 Mccp分离株以及肯尼亚的F38、ILRI181 Mccp分离株同源性为100%；与世界动物卫生组织（WOAH）改良的CCPP液体培养基（pH 7.6，含醋酸铊）相比，CCPP液体培养基初始pH为8.4且不含醋酸铊时，Mccp生长浓度显著升高（P<0.05），分离株生长浓度最高可以达到10~(11) CCU/mL，并且Mccp的接种成功率提高20.93%。结果表明，本试验成功分离到5株Mccp，并且在CCPP液体培养基初始pH为8.4且不含醋酸铊的条件下，Mccp生长浓度显著提高（P<0.05），峰值达10~(11) CCU/mL，接种成功率也同步提升，为Mccp的分离鉴定以及提高其生长浓度提供更坚实的科学依据。
2026年03期 v.62 76-84页 [查看摘要][在线阅读][下载 1803K] [下载次数：73 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：26 ]