- 吴昌旭;张金武;彭春子;吕茂杰;杨世森;韦英益;陈海兰;何家康;胡庭俊;于美玲;
为了探究转铁蛋白(Tf)修饰的辣蓼黄酮(FPHL)脂质体(Tf-FPHL-Lip)的药代动力学特征并明确Tf修饰对脂质体(Lip)体内外血脑屏障(BBB)透过能力的影响,本试验建立大鼠血浆中FPHL的芦丁成分含量测定的高效液相色谱(HPLC)分析方法,分析Tf-FPHL-Lip在大鼠体内的药代动力学特征;利用小鼠脑微血管内皮细胞(bEnd3)和小脑星形胶质细胞(C8-D1A)建立体外BBB模型,考察Lip透过体外BBB的能力;将Tf-FPHL-Lip经尾静脉注射小鼠,通过小动物活体成像技术观察荧光标记的Lip在小鼠体内的分布,考察Tf-FPHL-Lip透过体内BBB的能力。结果显示,建立的大鼠血浆中芦丁含量测定的HPLC分析方法的专属性、线性、回收率和精密度等均满足药动学分析方法的要求。与FPHL组相比,FPHL-Lip组和Tf-FPHLLip组的达峰浓度(C_(max))、血药浓度-时间曲线下面积(从0到无穷大)(AUC_(0-∞))、血药浓度-时间曲线下面积(从0到t)(AUC_(0-t))、平均驻留时间(MRT_(0-∞))和半衰期(T_(1/2))均极显著升高(P<0.01),清除率(CL)极显著降低(P <0.01);Tf-FPHL-Lip组的C_(max)、AUC_(0-∞)、AUC_(0-t)、MRT_(0-∞)和T_(1/2)分别为FPHL-Lip组的1.12、1.17、1.16、1.01和1.03倍;Tf-FPHL-Lip组的药时曲线下的峰面积最大,而FPHL组的药时曲线下的峰面积最小。Tf修饰的罗丹明B(RhB)脂质体(Tf-RhB-Lip)组在Transwell小室下层荧光信号强度极显著高于罗丹明B脂质体(RhB-Lip)组(P <0.01),表明Lip经Tf修饰后可以透过体外BBB。Tf修饰的吲哚箐绿(ICG)脂质体(Tf-ICG-Lip)组小鼠脑部荧光信号强度极显著高于吲哚箐绿脂质体(ICG-Lip)组和ICG组(P <0.01),并且维持时间长达36 h,表明Lip经Tf修饰后可以透过体内BBB。综上,Tf修饰可促进脂质体药物透过体内外BBB,增加脂质体药物体内吸收,Tf-FPHL-Lip具有一定的缓释作用。本试验结果为Tf-FPHL-Lip的脑部递送提供理论基础,为临床用药提供理论依据。
2025年04期 v.61 1-10页 [查看摘要][在线阅读][下载 2122K] [下载次数:229 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:44 ] - 孙志文;王忠;于莹;赵营;张晶晶;魏紫嫣;方芳;马立才;
本试验旨在建立可检测鸡蛋中氟苯尼考(FF)残留的均相光激化学发光免疫分析方法(AlphaLISA)。通过化学方法合成FF生物素半抗原,利用O-羧甲基羟胺法偶联FF抗体与受体微球,通过筛选确定鸡蛋样品稀释倍数,采用棋盘法确定FF抗体标记受体微球和FF生物素半抗原的浓度,最后基于FF抗体标记受体微球、FF生物素半抗原和链霉亲和素修饰供体微球,优化建立了检测鸡蛋中FF残留的AlphaLISA检测方法,并评价其灵敏度、特异性、准确性和重复性,及与国家标准方法GB 31658.20—2022《动物性食品中酰胺醇类药物及其代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法》的一致性。质谱分析结果显示,FF生物素半抗原与目标分子的分子量一致(636 Da)。经评估,鸡蛋样品离心上清液采用25倍稀释方案。建立的AlphaLISA方法对鸡蛋中FF的检测限为0.57μg/kg,定量限为0.92μg/kg;添标回收率介于87.00%~99.50%,日内和日间变异系数均低于5%;与氟苯尼考胺的交叉反应率较高(93.27%),与12种常见兽药的交叉反应率极低(<0.1%);与国家标准方法比较,2种方法在5个添加浓度点的检测结果高度一致(R2=0.997)。结果表明,本试验建立的AlphaLISA具有高灵敏度、准确性、重复性和操作简便等优点,适用于鸡蛋中FF残留的快速检测,为鸡蛋安全监测提供了高效且可行的方案。
2025年04期 v.61 11-19页 [查看摘要][在线阅读][下载 1432K] [下载次数:78 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:23 ] - 张敏;李海涛;刘高;叶忠明;刘怡雯;且华敏;田维;汤承;张润慧;杨丹娇;
为了解四川省甘孜州部分地区藏猪消化道寄生虫感染情况,本试验在6个藏猪养殖地区共采集了41.5份藏猪新鲜粪便样品,对其中353份样品通过饱和糖盐水漂浮法进行虫卵形态学检测,并分析其感染率和感染强度;对所有样品基于内转录间隔区1(ITS-1)基因位点对猪囊等孢球虫(Cystoisospora suis)进行分子扩增和遗传进化分析;根据问卷调查结果对不同年龄、饲养方式、季节以及是否腹泻和驱虫藏猪寄生虫感染差异进行数据统计分析。形态学观察结果显示,共检测出线虫和球虫2种消化道寄生虫,总感染率为73.94%(261/353),其中球虫感染率为58.36%(206/353),线虫感染率为50.14%(177/353),线虫主要为蛔虫感染(37.9.6%,134/353)。麦克马斯特计数结果显示,球虫平均每克粪便卵囊量(OPG)为(3 923.62±6 660.12)个,线虫平均每克粪便虫卵量(EPG)为(990.49±514.51)个。PCR检测结果显示,猪囊等孢球虫总阳性率达到了45.06%(187/415);其中以放养藏猪感染最为常见,其感染率达68.89%(31/45);腹泻藏猪感染率显著高于健康藏猪(χ~2=4.93,P<0.05)。经对比分析,该地区夏季藏猪最易滋生消化道寄生虫病,其中色达县和泸定县感染情况严重;仔藏猪消化道寄生虫总感染率极显著高于成年藏猪(χ~2=13.85,P<0.01);腹泻藏猪总感染率显著高于健康藏猪(χ~2=5.09,P<0.05);不同饲养方式藏猪的总感染率无显著性差异(P> 0.05);驱虫藏猪与未驱虫藏猪线虫感染率无显著性差异(P>0.05)。结果表明,甘孜州部分地区藏猪寄生虫感染情况严重,该结果可为该地区寄生虫病防控工作提供理论依据和数据支持。
2025年04期 v.61 20-27页 [查看摘要][在线阅读][下载 1626K] [下载次数:157 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:24 ] - 杨涛;郝力力;拉巴次仁;党发发;旺扎;益西尊姆;向阳;次仁桑珠;白玛玉珍;普布卓玛;宁立宏;冯青;
为了解西藏部分地区家犬感染细粒棘球绦虫和十二指肠贾第虫的基本情况,本试验基于细粒棘球绦虫烟酰胺脱氢酶亚基Ⅰ(nadⅠ)基因以及十二指肠贾第虫磷酸丙糖异构酶(tpi)、β-贾第素(bg)和谷氨酸脱氢酶(gdh)基因,采用巢式PCR方法对采集自拉萨市和林芝市4个乡镇(工卡镇、日多乡、娘蒲乡和加兴乡)的553份家犬粪便样本进行检测,并对PCR阳性产物进行测序、序列比对和遗传进化分析,从而确定细粒棘球绦虫和十二指肠贾第虫的感染情况和遗传进化关系。结果显示,本试验共检出57份细粒棘球绦虫阳性样本,总阳性率为10.3%(57/553),遗传进化分析结果显示,阳性样本为细粒棘球绦虫G5基因型[奥氏棘球绦虫(Echinococcus ortleppi)];共检出46份十二指肠贾第虫阳性样本,总阳性率为8.3%(46/553),遗传进化分析结果显示,阳性样本基因型为十二指肠贾第虫集聚体C、D和G。结果表明,西藏部分地区家犬细粒棘球绦虫和十二指肠贾第虫感染率均较高,家犬粪便中检出的细粒棘球绦虫G5基因型目前在我国报道较少,检出的十二指肠贾第虫集聚体G仅感染啮齿类动物,提示调查地区细粒棘球绦虫和十二指肠贾第虫出现了新的流行情况。本试验为当地犬寄生虫病的防控提供了重要数据支撑,后期应进一步加强犬只监测,并做好相应的管理和驱虫工作。
2025年04期 v.61 28-36页 [查看摘要][在线阅读][下载 1850K] [下载次数:60 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:12 ] - 付嘉佳;李富祥;王金萍;何于雯;谢佳芮;高华峰;李小兵;
为了解云南省部分地区库蠓源蓝舌病病毒(BTV)流行情况,本试验于2023年7—10月分别从云南省昆明市宜良县和保山市龙陵县采集昆虫样品进行种属鉴定和虫媒病毒分离鉴定。基于昆虫的线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因序列进行BLAST序列比对和种属鉴定。通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测、病毒分离培养、间接免疫荧光试验和病毒毒价测定对所获得的虫媒病毒进行分离和鉴定,以及遗传进化分析。结果显示,采集的昆虫样品分别属于尖音库蚊、隐匿库蠓、拜氏铗蠓和蠓科。其中,采自云南省保山市龙陵县的样品RT-PCR检测结果为BTV阳性,经BHK-21细胞连续传代培养,得到1株BTV分离株;间接免疫荧光试验结果显示,分离株能与BTV-16标准阳性血清发生特异性反应,初步确定该分离株为BTV-16,将其命名为YNLL-BTV16-2023,其毒价为10-5.1/0.1 mL。遗传进化分析结果显示,分离株VP2基因序列与2株日本分离株基因序列(GenBank登录号:LC586239.1和AB686220.1)核苷酸同源性最高,分别为97.20%和96.87%,VP3基因序列与中国云南省分离株VP3基因序列(GenBank登录号:MG564322.1)核苷酸同源性为99.26%,VP5基因序列与日本分离株(GenBank登录号:AB686236.1)核苷酸同源性为97.77%,VP7基因序列与2株中国分离株(GenBank登录号:AF172831.1和KT002584.1)核苷酸同源性均为98.80%。结果表明,云南省保山市龙陵县边境地区存在BTV-16毒株,该血清型病毒可通过隐匿库蠓携带。本试验为云南省边境地区BTV及其传播媒介的分布提供参考。
2025年04期 v.61 37-43页 [查看摘要][在线阅读][下载 2588K] [下载次数:78 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:10 ] - 周于凯;孙富燕;吕玺玮;何晓蝶;李鸿亮;李文鹏;刘道鑫;洪金;高磊;
为了探究有毒植物瑞香狼毒对小鼠肝脏损伤和糖代谢的影响,本试验将小鼠分为对照组、试验组Ⅰ组和试验Ⅱ组,分别饲喂0、5和10 g/(kg·d)的瑞香狼毒,观察小鼠临床症状并检测体重增加量,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清生化指标变化,苏木精-伊红(H. E.)染色检测肝脏组织学变化,实时荧光定量聚合酶链式反应(qPCR)检测糖代谢相关基因腺嘌呤核糖核苷酸活化蛋白激酶-α1(Ampkα1)、信号转导与转录激活因子-3(Stat3)、葡萄糖-6-磷酸酶催化亚基-1(G6pc1)和沉默信息调节因子-1(Sirt1)在小鼠肝脏中的表达变化,蛋白免疫印迹(WB)检测糖代谢蛋白AMPKα1在小鼠肝脏中的表达变化。结果显示,饲喂瑞香狼毒的2个试验组小鼠均出现不同程度的精神沉郁、行动缓慢和被毛杂乱等症状;与对照组相比,试验I组体重增加量在7和28 d时显著降低(P <0.05或P <0.01),试验II组在整个试验过程中均极显著降低(P <0.001);试验II组在14、21和28 d时极显著低于试验I组(P <0.01或P <0.001);与对照组相比,2个试验组血清葡萄糖(GLU)和总蛋白(TP)水平均极显著降低(P <0.001),碱性磷酸酶(ALP)和谷丙转氨酶(ALT)活性均极显著升高(P <0.001),试验II组总胆固醇(TCH)、总胆红素(TBIL)水平和谷草转氨酶(AST)活性均极显著升高(P <0.001);与试验I组相比,试验II组GLU水平极显著降低(P <0.01),TCH、TBIL水平和ALP、ALT、AST活性均极显著升高(P <0.01或P <0.001);2个试验组小鼠肝脏肝细胞索正常结构被破坏、肝细胞坏死并伴有淤血和炎性细胞浸润的病理学变化;与对照组相比,试验I组肝脏Sirt1和G6pc1基因表达量显著下调(P <0.05),试验II组Ampkα1、Stat3和G6pc1基因表达量极显著下调(P <0.01或P <0.001);试验II组Ampkα1、Sirt1、Stat3和G6pc1基因表达量显著或极显著低于试验I组(P <0.05,P <0.01或P <0.001);试验Ⅱ组肝脏AMPKα1蛋白表达量极显著低于对照组和试验I组(P <0.001)。结果表明,瑞香狼毒造成小鼠肝脏组织病理损伤,抑制小鼠肝脏糖代谢相关基因和蛋白的表达,使肝脏糖代谢产生障碍。
2025年04期 v.61 44-52页 [查看摘要][在线阅读][下载 2454K] [下载次数:137 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:11 ] - 汪鎔金;解佑银;刘关童;张雷芳;
为了探究白杨素是否能改善2型糖尿病(T2DM)小鼠的肝肾损伤,本试验选用40只雄性ICR小鼠随机分为对照组、模型组、二甲双胍组和白杨素组,采用高脂饮食诱导联合腹腔注射链脲佐菌素(STZ)[150 mg/(kg·bw)]建立T2DM小鼠模型。对照组和模型组每天灌胃生理盐水,二甲双胍组每天灌胃二甲双胍[200 mg/(kg·bw)],白杨素组每天灌胃白杨素[100 mg/(kg·bw)],连续灌胃30 d,期间每隔6 d测定小鼠空腹血糖(FBG)值。给药30 d后采集小鼠血液,取肝脏、肾脏和胰腺。测定血清中糖化血清蛋白(GSP)、血脂相关指标[总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)]、丙二醛(MDA)、肌酐(CRE)和尿素(Urea)含量,谷草转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷丙转氨酶(ALT)活性;测定肝脏组织中SOD、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、己糖激酶(HK)和丙酮酸激酶(PK)活性以及MDA和肝糖原含量;制作肝脏、肾脏和胰腺组织的苏木精-伊红(H. E.)染色病理切片,观察病理学变化。结果显示,与对照组相比,模型组小鼠FBG值持续升高,血脂代谢异常,血清中GSP、TC、TG和LDL含量均极显著增加(P <0.01),HDL含量和SOD活性极显著降低(P <0.01),MDA含量显著升高(P <0.05),ALT和AST活性、CRE和Urea含量均极显著增加(P <0.01),肝脏组织中SOD、GSH-Px、HK、PK活性和肝糖原含量均极显著降低(P <0.01),MDA含量极显著升高(P <0.01)。与模型组相比,白杨素组和二甲双胍组小鼠血脂代谢异常情况均有所改善;白杨素组和二甲双胍组小鼠血清中GSP和MDA含量、AST活性、CRE和Urea含量均极显著减少(P <0.01),SOD活性极显著升高(P <0.01),二甲双胍组ALT活性极显著降低(P <0.01);白杨素组和二甲双胍组小鼠肝脏组织中GSH-Px、HK、PK活性和肝糖原含量均极显著升高(P <0.01),MDA含量显著降低(P <0.05或P <0.01),白杨素组SOD活性显著升高(P <0.05)。组织病理学观察结果显示,白杨素和二甲双胍均能减轻T2DM小鼠肝脏、肾脏和胰腺的病理损伤。结果表明,白杨素对T2DM小鼠肝肾损伤具有一定的改善作用。
2025年04期 v.61 53-61页 [查看摘要][在线阅读][下载 4290K] [下载次数:336 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:12 ] - 赵方钰;崔慧珍;王一新;常爽;任志浩;崔文平;赵鹏;
为了比较6种不同J亚群禽白血病病毒(ALV-J)检测试剂盒的检测结果,以更好地实施禽白血病净化和鸡苗洁净度评估。本试验首先将ALV-J参考株以卵黄囊接种感染无特定病原体(SPF)鸡胚构建雏鸡携带ALV-J模型,对出壳雏鸡逐一采集胎粪和抗凝血,随后分别将胎粪滤液和血浆接种鸡胚成纤维传代(DF-1)细胞进行病毒培养,维持7 d时收取细胞上清,以A、B、C三家公司的ALV p27抗原酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒以及商品化的磁微粒化学发光检测试剂盒、胶体金试纸条和实时荧光定量PCR检测试剂盒分别对胎粪、不同稀释度胎粪样品、胎粪病毒分离细胞上清和血浆病毒分离细胞上清进行检测。结果显示,6种不同试剂盒对胎粪、胎粪病毒分离细胞上清和血浆病毒分离细胞上清的检测结果判定总体一致,其中以磁微粒化学发光检测试剂盒读数判定最为直观,其阳性样品与阴性样品的读值区分明显、易于判断。对不同稀释度胎粪样品的检测结果显示,以A公司ALV p27抗原ELISA试剂盒、磁微粒化学发光检测试剂盒和实时荧光定量PCR检测试剂盒相对灵敏,可检出低滴度病原。结果表明,不同检测方法对ALV-J检测的整体判定差异不显著,但针对低滴度样品检测时不同方法的检出率有差异,需要根据情况选择方法。
2025年04期 v.61 62-69页 [查看摘要][在线阅读][下载 1143K] [下载次数:164 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:15 ] - 张泽华;谢占峰;吕世春;张晗;贾振伟;
为了研究促性腺激素释放激素(GnRH)或人绒毛膜促性腺激素(HCG)处理黄体早期阶段西门塔尔肉牛对血清激素水平和繁殖性能的影响,本试验选择繁殖机能正常的母牛60头,随机分为3个组,每组20头,进行同期发情和人工授精,人工授精后5 d,GnRH组母牛肌肉注射GnRH (200μg/头),HCG组每牛肌肉注射HCG (3 000 IU/头),对照组母牛注射生理盐水。于人工授精后5和14 d检测各组母牛血清孕激素(P4)、雌二醇(E2)和干扰素-tau(IFNT)水平;人工授精后45 d进行妊娠诊断,统计受胎率;母牛分娩后统计产犊率和犊牛初生重。结果显示,GnRH组和HCG组母牛人工授精后14 d,血清P4和IFNT水平均显著高于对照组(P<0.05),血清E2水平显著低于对照组(P<0.05);GnRH组和HCG组母牛受胎率、产犊率和犊牛初生重均高于对照组,但差异不显著(P>0.05)。结果表明,GnRH或HCG处理黄体早期阶段西门塔尔肉牛,可显著提高血清P4和IFNT水平,显著降低血清E2水平,且受胎率升高了10%~15%。本试验结果可为提高肉牛繁殖效率和促进高效生产提供一定的参考依据。
2025年04期 v.61 70-74页 [查看摘要][在线阅读][下载 1108K] [下载次数:102 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:7 ] - 路浩;贺桂芬;徐盟龙;李振坤;李阳;董芳婷;袁晋;张越;魏战勇;
为了建立科学精准的针对伪狂犬病毒(PRV)的洗消体系,本试验于已空置6个月的规模化猪场采集了663份环境样品,利用荧光定量PCR方法对场内PRV分布情况进行了检测与分析。结果显示,该猪场洗消中心、猪舍和粪污处理区的PRV核酸检出率依次为25.00%(10/40)、42.11%(256/608)和0(0/15);其中,洗消中心的减速带的PRV核酸检出率最高,为100%(10/10);猪舍样品中配怀舍、育肥舍、分娩舍和保育舍的PRV核酸检出率分别为50.00%(76/152)、46.05%(70/152)、38.16%(58/152)和34.21%(52/152);猪舍中料桶、食槽、挡板、粪板上表面、粪板下表面和粪沟的PRV核酸检出率较高。总之,本试验初步明确了已空置6个月猪场的PRV核酸残留情况,并发现了若干日常洗消工作盲点和遗漏点,为猪场建立科学精准的洗消体系提供了数据支持。
2025年04期 v.61 75-79页 [查看摘要][在线阅读][下载 1277K] [下载次数:83 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:15 ] - 白玉婷;张欣欣;于方凌;白玉彬;李海權;张继瑜;李冰;
为了建立并验证氟雷拉纳咀嚼片微生物限度检查方法,本试验分别考察平皿常规法和平皿中和法去除氟雷拉纳咀嚼片中抑菌成分活性的效果,进行需氧菌(枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌)、霉菌和酵母菌总数的测定,并对控制菌(大肠埃希菌和沙门菌)进行检查,筛选出最优的检查方法进行供试品微生物限度检查。结果显示,中和法可以较好地消除氟雷拉纳咀嚼片中抑菌成分的抑菌活性,使用中和法进行试验,需氧菌、霉菌和酵母菌的回收率均介于50%~200%,控制菌阳性对照组中菌落生长良好,供试品组和阴性对照组中均无细菌生长,符合《中华人民共和国兽药典》规定,可使用中和法进行供试品中微生物计数及控制菌大肠埃希菌和沙门菌检查。本试验所建立方法(中和法)准确可行,能有效去除氟雷拉纳咀嚼片处方中抑菌成分的抑菌性,适用于氟雷拉纳咀嚼片微生物限度检查,为氟雷拉纳咀嚼片的质量评价提供参考。
2025年04期 v.61 80-86页 [查看摘要][在线阅读][下载 1147K] [下载次数:156 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:0 ] |[阅读次数:11 ]