- 刘辉;佘锐萍;刘天龙;刘波;
为了研究鸡血抗菌肽(CBAP)对保育猪促生长与免疫调节的影响,本试验选取20头65日龄杜洛克种猪,随机分为2组,口服饲喂30 d CBAP。试验结果表明,与对照组相比,饲喂CBAP的保育猪表现出更好的生长性能,日增重比对照组增长88 g/d,提高了13.7%,CBAP组猪群料肉比与对照组相比降低0.18,下降了10.4%,日增重与料肉比效果差异显著(P<0.05)。从先天免疫效果来看,CBAP组猪群血清补体C3、C4,γ-干扰素差异显著(P<0.05),脾淋巴细胞转化率差异极显著(P<0.01)。体液免疫方面,CBAP对猪伪狂犬病(PR)疫苗免疫后的gB抗体,猪口蹄疫(FMD)O型、A型二价灭活疫苗O、A抗体效价提升差异显著(P<0.05),对猪瘟(CSF)疫苗免疫抗体效价改善差异不显著(P>0.05)。上述结果表明,CBAP对保育猪有明显促生长与免疫调节作用。
2020年11期 v.56 1-5+10+117页 [查看摘要][在线阅读][下载 1452K] [下载次数：176 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：7 ] |[阅读次数：43 ] - 秦晓冰;周建梅;张洪亮;单虎;
为研究卵黄抗体对牛轮状病毒(BRV)的预防与治疗效果,本试验收集山东某牛场的腹泻粪便样本接种MA104细胞进行病毒分离、纯化,采用RT-PCR和电镜进行鉴定。将分离株增殖灭活制成油苗多次免疫产蛋鸡,收集高免鸡蛋,用水稀释-盐析法纯化卵黄抗体(IgY),用琼扩法测定抗体效价,进行安全性检测。选10头1日龄BRV阴性的犊牛,随机均分为2组,人工感染BRV,进行犊牛口服IgY疗效观察。结果显示:病毒盲传至第8代后出现稳定细胞病变,经蚀斑纯化后测得病毒滴度为10~(-5.62) TCID_(50)/mL;分离毒株经RT-PCR和电镜观察证实为BRV,命名为SD-LX株。SD-LX株灭活油苗免疫蛋鸡后得到滴度为1∶64的IgY,该抗体对犊牛感染BRV的保护率与对照组相比为100%,治愈率为40%。本试验成功分离到1株BRV,该毒株油苗免疫蛋鸡制成的IgY对犊牛BRV有良好的保护作用。
2020年11期 v.56 6-10+118页 [查看摘要][在线阅读][下载 1358K] [下载次数：351 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：42 ] - 张中华;吴凤笋;吕玉金;刘玲玲;张世军;李文刚;
为进一步了解猪伪狂犬病病毒新流行株的变异特点,2018年对来自河南省济源市某猪场疑似猪伪狂犬病的病料组织进行PRV的分离鉴定,并分析其生物学特性。结果表明,分离株HNJY对小鼠具有致病性;HNJY株gE、gB、gD与国内毒株的核苷酸和氨基酸同源性分别高达99.2%～99.9%和98.6%～100%、99.7%～100.0%和99.2%～100.0%、99.4%～99.9%和99.3%～99.8%,gC基因与2011年之后分离的国内变异株的核苷酸和氨基酸同源性分别高达99.8%～100.0%和99.4%～100.0%,TK基因与2011年之后分离的国内变异株的序列同源性高达100%。从遗传进化来看,gE、gB基因可作为鉴别中国毒株和欧美毒株的标记基因,gC基因与分离年代有一定联系,gD、TK基因与分离年代无明显关联。综上表明,分离株HNJY株为新的国内变异株。
2020年11期 v.56 11-16+21页 [查看摘要][在线阅读][下载 1463K] [下载次数：127 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：41 ] - 樊兆斌;张淑萍;葛中东;周宛蓉;张凯;夏宇欣;姜莉莉;蒋培红;
本试验克隆中华蜜蜂磷酸丙糖异构酶(Tpi)基因,并对其编码产物进行生物信息学分析预测。利用RT-PCR方法扩增中华蜜蜂幼虫Tpi基因(AcTpi),并对其核苷酸和推导氨基酸序列进行遗传演化分析,利用生物信息学软件对AcTpi编码的蛋白功能进行分析和预测。预测分析结果表明,AcTpi具有完整的开放阅读框(ORF),CDS区为744 bp,编码247个氨基酸。理论分子量为26.88 kDa,理论等电点为7.76,不稳定系数为27.32,脂肪系数为93.52,平均亲水指数为-0.182。存在3个明显的疏水区,无信号肽,不存在跨膜区;其编码蛋白较稳定,为亲水性蛋白。二级结构预测显示,AcTpi编码的蛋白以无规则卷曲为主,存在多个α螺旋和β折叠区域。本试验成功克隆了中华蜜蜂幼虫Tpi基因,为深入研究AcTpi功能提供依据,为进一步阐明AcTpi在糖酵解过程中的作用及其功能的开发应用提供了科学依据。
2020年11期 v.56 17-21+119页 [查看摘要][在线阅读][下载 1621K] [下载次数：156 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：61 ] - 赵全邦;沈艳丽;胡广卫;郭春兰;李静;马占全;王晓润;蔡金山;张志平;杨毅青;
为进一步有效控制包虫病的流行,评估畜间包虫病防控中既定目标完成情况,客观分析与计划目标存在的差距、寻找原因,总结好的经验和措施,综合规划终期目标实现的可能性和下一步措施,确保《全国包虫病等重点寄生虫病防治规划(2016—2020年)》和《青海省防治包虫病行动计划(2016—2020年)》等规划计划目标的如期完成,于2018年9月—2019年9月抽查青海省8个市(州)、16个县(市、区),共调查犬只196 153条、剖检犬只160条,实验室检测犬粪样品806份、羊血清样品400份,屠宰场检查牛339头、羊605只,考试调查专业技术人员186名,问卷调查农牧民群众627名,对青海省畜间包虫病防治效果进行了评估。结果显示:全省家犬登记管理率平均为93.13%;家犬规范驱虫率平均为86.80%;剖检法检测犬棘球绦虫的感染率为0.63%,犬粪棘球绦虫抗原检测阳性率为4.96%,牛棘球蚴的感染率为9.14%,羊棘球蚴的感染率为4.79%;羊免疫抗体平均合格率为65.00%;专业技术人员防治知识合格率为90.32%;群众防治知识知晓率平均为79.05%。各项指标中除牛棘球蚴的感染率和羊免疫抗体平均合格率低于相关要求外,其他指标均高于相关目标,表明畜间包虫病防治效果明显。
2020年11期 v.56 22-25页 [查看摘要][在线阅读][下载 1055K] [下载次数：121 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：41 ]
- 王子书;王萍;许健;杨大为;李永清;江波;
为构建表达传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因和鸡新城疫病毒(NDV)F基因的重组火鸡疱疹病毒(HVT)。本研究利用基因重组技术,在HVT基因组的非必需区UL45-46插入CMV启动子调控下的IBDV LX株的VP2基因表达盒,然后在HVT基因组的非必需区US1-10插入pec启动子调控下的NDV PX02/3株的F基因表达盒,成功构建并拯救出同时表达IBDV和NDV保护性抗原基因的重组HVT病毒(rHVT-VP2-F)。经PCR、Western Blot、IFA鉴定,重组病毒能稳定表达具有生物学活性的VP2蛋白和F蛋白。本研究为研制rHVT-VP2-F活载体疫苗提供了科学依据。
2020年11期 v.56 26-30+120-121页 [查看摘要][在线阅读][下载 1993K] [下载次数：250 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：42 ] - 徐璐;张乾义;夏应菊;任雪健;李翠;邹兴启;徐嫄;王兆;赵启祖;王琴;
为了验证猪瘟病毒化学发光竞争ELISA抗体检测试剂盒的临床应用效果,对6个地区的2 200份血清样本进行检测,并采用进口试剂同步检测,比较2种试剂盒的一致性;田间筛选了391份猪瘟抗体阴性和阳性血清,采用该试剂盒与荧光抗体病毒中和试验同时进行检测,比较试剂盒的一致性;为了进一步验证对免疫抗体的检出情况,采用本试剂盒定期对猪瘟疫苗免疫后抗体消长情况进行检测。结果显示:本试剂盒与进口试剂盒具有高度的一致性(Kappa值为0.78);与荧光抗体病毒中和试验的结果几乎完全一致(Kappa值为0.908);免疫后18 d,所有免疫猪的抗体全部转阳。
2020年11期 v.56 31-33+122页 [查看摘要][在线阅读][下载 1394K] [下载次数：268 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：6 ] |[阅读次数：26 ] - 罗伏兵;刘晓冬;梁琳;刘贤勇;徐发荣;沈光年;马志军;索勋;汤新明;
为了研究巨型艾美耳球虫顶膜抗原1(AMA1)的细胞定位及功能,制备了抗AMA1的单克隆抗体并进行了鉴定。首先,用大肠杆菌(DE3)表达了巨型艾美耳球虫AMA1蛋白,蛋白经纯化后免疫小鼠,测定小鼠血清中AMA1抗体滴度。然后进行杂交瘤细胞的制备和克隆筛选,获得了16株分泌产生AMA1抗体的杂交瘤细胞株。最后用免疫印迹和间接免疫荧光试验对上述单克隆抗体进行鉴定。结果显示,编号为21和34的杂交瘤细胞株产生的抗体可识别巨型艾美耳球虫可溶性抗原中的AMA1组分;编号为34和35的抗体与巨型艾美耳球虫子孢子反应后,荧光信号集中于子孢子的顶质体和细胞膜部位。本试验制备的抗AMA1的单克隆抗体,为巨型艾美耳球虫生物学和免疫学研究提供了科学依据。
2020年11期 v.56 34-36+123页 [查看摘要][在线阅读][下载 1470K] [下载次数：135 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：0 ] |[阅读次数：45 ] - 秦毅斌;苏乾莲;赵硕;卢冰霞;何颖;周展宏;袁婷婷;李斌;段群棚;欧阳康;赵武;
为建立猪捷申病毒(PTV)的TaqMan实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)检测方法,在PTV基因组序列保守区设计引物和TaqMan探针,构建重组质粒作为阳性标准品,通过优化反应条件,建立了检测PTV的RT-qPCR方法,并进行特异性、敏感性和重复性试验。结果表明,该方法仅对PTV出现特异性扩增反应,与猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、猪传染性胃肠炎病毒、A群猪轮状病毒等常见猪病毒均无交叉反应。该方法的标准曲线Ct值与4.6×10~8～4.6×10~2拷贝/μL的质粒浓度范围具有良好线性关系,标准曲线方程为Ct=-3.201×logX+40.527,线性相关系数(R~2)为0.996,检测下限为4.6×10~1拷贝/μL。对不同浓度的pMD18-PTV进行组内与组间重复检测,每个浓度重复试验的Ct值的变异系数均小于4.0%,具有良好的重现性。应用所建立的方法对235份临床猪腹泻样品进行检测,PTV阳性样品32份,样品阳性率为13.62%。本试验建立的RT-qPCR方法为PTV实验室检测及病毒研究分析提供了可靠的技术手段。
2020年11期 v.56 37-42+46页 [查看摘要][在线阅读][下载 1523K] [下载次数：241 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：42 ] - 王丽荣;董永军;张守平;樊俊洋;李任峰;王振伟;李玲;王三虎;
为了研究副猪嗜血杆菌(Haemophilus parasuis)河南分离野毒株对昆明(KM)小鼠的致病性以及在感染KM小鼠体内组织器官的分布,将Hps血清5型标准菌株和河南分离野毒株采用灌胃和腹腔感染KM小鼠,观察2个Hps菌株对小鼠的致病性并测定Hps在感染小鼠体内组织器官的分布。结果显示,Hps河南分离野毒株和血清5型标准菌株腹腔、灌胃感染KM小鼠,在不同时间均出现发病,以腹腔感染发病症状严重、死亡率高,其中河南分离野毒株腹腔感染死亡率为2/7,血清5型标准菌株腹腔感染死亡率为1/7,死亡集中在攻毒后43～50 h;剖检死亡小鼠肉眼可见肺脏出血点、胸腔积液等病理变化。表明河南分离野毒株和标准菌株5型对KM小鼠均有致病性,为深入研究副猪嗜血杆菌的致病机制、免疫及防控该病提供科学依据。
2020年11期 v.56 43-46+122页 [查看摘要][在线阅读][下载 1493K] [下载次数：145 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：45 ] - 王改芳;
为了研究酵母菌复合微生态制剂对杜寒杂交肉羊免疫机能及抗氧化能力指标的影响。试验选择健康、体重为(20±2.2)kg的杜寒杂交肉羊120只,随机分成4个组,每组3个重复,每个重复10只,分别为空白对照组(1组)和5.0%(2组)、 10.0%(3组)、15.0%(4组)酵母菌复合微生态制剂添加组,试验期为56 d。在试验第1、28、56天采血,测定免疫及抗氧化能力指标。结果显示:在试验第28、56天,试验3、4组血清中IgG、IgA、IL-2含量显著高于1组(P<0.05),试验3、4组血清中超氧化物歧化酶(T-SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)活性显著高于1组(P<0.05);试验2、3、4组的杜寒杂交肉羊血清中IgM、IL-6含量均高于1组,但差异不显著(P>0.05);试验2、3、4组的杜寒杂交肉羊血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力均高于1组,但差异不显著(P>0.05)。在基础日粮中添加10.0%酵母菌复合微生态制剂能显著提高杜寒杂交肉羊免疫功能及抗氧化能力,为下一步的酵母菌复合微生态制剂在肉羊生产应用提供理论基础。
2020年11期 v.56 47-50+54页 [查看摘要][在线阅读][下载 1224K] [下载次数：1055 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：11 ] |[阅读次数：34 ] - 李乔斌;张云丹;何玲;岳筠;李梅;谢晓东;程振涛;
由安卡拉病毒引起的鸡心包积液-肝炎综合征发病急,传播速度快,造成雏鸡的高死亡率。为快速确诊,实现早发现早控制,本试验根据安卡拉病毒主要结构蛋白六邻体(Hexon)基因序列,设计1对特异性引物,优化反应体系,并对其进行特异性、敏感性和临床样本检测,以期建立检测安卡拉病毒的PCR方法。结果显示,可扩增出295 bp特异性片段,最佳模板质量浓度确定为4.38×10~(-2)g/L,最佳退火温度为58℃。该方法具有较好的特异性、灵敏性和临床应用性,可对临床FAdV-4感染病例作出快速检测,为疫病的快速鉴别诊断、及时防控提供参考价值。
2020年11期 v.56 51-54页 [查看摘要][在线阅读][下载 1380K] [下载次数：190 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：61 ] - 董青;宋予震;李建华;
本试验旨在探讨氯胺B溶液(苯磺酰氯胺钠盐)对鸡球虫卵囊的培养和保存条件以及对鸡球虫病四价活疫苗(柔嫩艾美耳球虫、毒害艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫和堆型艾美耳球虫)的免疫保护效果,从而改进鸡球虫活卵囊疫苗工业化生产工艺。采用不同浓度的氯胺B溶液,将新鲜收集的4种鸡球虫卵囊各分成7组,每组1.0×10~6个卵囊/mL,于培养后不同时间记录孢子化卵囊的数量,计算孢子化率。并通过动物试验进行安全性试验和效力检验。结果显示:鸡球虫卵囊在1.2%的氯胺B溶液中孢子化率可以提高至90%以上,同时氯胺B溶液可抑制细菌的生长;氯胺B溶液中保存的鸡球虫病四价活疫苗在13个月内,疫苗性状和卵囊数量均未受到影响;疫苗在2～8℃保存至11个月活力仍不受影响,仍表现出良好的免疫保护效果,且1.2%的氯胺B溶液对鸡体安全无毒副作用。表明1.2%的氯胺B溶液可以取代重铬酸钾作为鸡球虫活疫苗的培养和保存液。
2020年11期 v.56 55-58+62页 [查看摘要][在线阅读][下载 1223K] [下载次数：111 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：2 ] |[阅读次数：31 ] - 王改芳;
为了研究酵母菌复合微生态制剂对杜寒杂交肉羊生长性能及血液生化指标的影响,试验选择体重为(20±2.2)kg的杜寒杂交肉羊120只,随机分成4个组,每组3个重复,每个重复10只,分别为空白对照组(1组)和5.0%(2组)、10.0%(3组)、 15.0%(4组)酵母菌复合微生态制剂添加组,试验期为56 d,测定生产性能和血液生化指标。结果表明:试验2、3、4组杜寒杂交肉羊干物质采食量均低于1组,但差异不显著(P>0.05),试验3、4组杜寒杂交肉羊的平均日增重高于1组(P<0.05),其饲料转化率低于1组(P<0.05);试验3、4组杜寒杂交肉羊血清中总蛋白(TP)含量高于1组(P<0.05),其谷草转氨酶(GOT)和总胆固醇(TC)含量低于1组(P<0.05),试验2、3、4组杜寒杂交肉羊血清中白蛋白(ALB)含量均高于1组(P>0.05),其谷丙转氨酶(GPT)和血尿素氮(BUN)含量均低于1组(P>0.05)。表明在基础饲料中添加10.0%酵母菌复合微生态制剂可以提高杜寒杂交肉羊生长性能,改善其血液生化指标。本试验为下一步的酵母菌复合微生态制剂在羊生产应用提供科学依据。
2020年11期 v.56 59-62页 [查看摘要][在线阅读][下载 1207K] [下载次数：197 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：3 ] |[阅读次数：38 ] - 郭青云;白加德;钟震宇;佀蓉蓉;白雪;单云芳;程志斌;孟玉萍;
为了解麋鹿的黏膜免疫屏障,采用甲苯胺蓝染色法研究初生麋鹿小肠各段肥大细胞的分布特征。结果显示,初生麋鹿十二指肠、空肠和回肠的肥大细胞形态多样,胞质中可见蓝紫色颗粒,主要分布在黏膜固有层、黏膜下层和肌层,少量分布在浆膜。空肠黏膜和黏膜下层的肥大细胞数量显著高于十二指肠和回肠(P<0.05),而十二指肠肌层的肥大细胞数量显著高于空肠和回肠(P<0.05)。这些结果为研究麋鹿肠道疾病提供了依据。
2020年11期 v.56 63-64+124页 [查看摘要][在线阅读][下载 1722K] [下载次数：108 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：1 ] |[阅读次数：41 ] - 袁淑辉;蔡军;王忠才;李舟;王建昌;王素华;
为建立4种肉类(牛肉、猪肉、鸡肉和马肉)成分的鉴别方法,本试验基于动物线粒体细胞色素b基因,设计1条通用正向引物CF,以牛、猪、鸡和马的特定DNA序列设计4条特异性反向引物R,优化反应条件,建立了多重PCR检测方法。该方法对牛、猪、鸡和马肉的检测灵敏度为10×10~(-3)ng/μL,具有良好的特异性。对80份市售肉制品样本进行检测,检出掺假样本31份,与本实验室常用的荧光定量PCR试剂盒检测结果一致。本试验建立的多重PCR方法能够有效地对牛、猪、鸡和马源性成分进行快速检测。
2020年11期 v.56 65-69页 [查看摘要][在线阅读][下载 1481K] [下载次数：220 ] |[网刊下载次数：0 ] |[引用频次：4 ] |[阅读次数：31 ]