鹅细小病毒VP1与VP3非重叠序列的克隆与原核表达Cloning and prokaryotic expression of non-repeated VP1 and VP3 gene sequence of goose parvovirus
布日额,吴金花,李勐,马广鹏,Ulrich Neumann
摘要(Abstract)：
根据鹅细小病毒 GPV H1株基因组核苷酸序列设计了一对引物 ,对其结构蛋白 VP1与 VP3非重叠核苷酸序列进行 PCR扩增 ,并克隆到表达性载体 p GEX- 6 p- 1,经酶切鉴定筛选出阳性克隆 ,并转化到大肠杆菌 BL 2 1(ED3) plys S进行原核表达 ,并用 SDS- PAGE鉴定 ,结果表明融合蛋白在表达性细菌 BL2 1中重获得了高效表达。
关键词(KeyWords)： 鹅细小病毒;VP1与VP3非重叠序列;克隆;原核表达
基金项目(Foundation): 黑龙江省“十五”攻关课题 (GB0 1B5 0 2 0 2 )。
作者(Author): 布日额,吴金花,李勐,马广鹏,Ulrich Neumann
Email:
DOI:
参考文献(References)：
- [1] 马君,章金钢,李雪梅,等.鹅细小病毒主要结构蛋白的扩增、克隆与原核表达载体的构键[J].中国兽医学报,2000,6:5554-556.
- [2] 殷震,刘景华.动物病毒学(第2版)[M].北京:科学出版社,1997.1165.
- [3] 卢圣栋主编.现代分子生物学实验技术(第二版)[M],北京:中国协和医科大学出版社,1999.110-117.
- [4] 娄华,白挨泉,顾万军,等.番鸭细小病毒MDPV-Q株VP2蛋白基因的克隆与序列测定[J].中国预防兽医学报,2000,1:4-7.
- [5] J.萨姆布鲁克,E.F.弗里奇,T.曼尼阿斯.分子克隆(第3版)[M],北京:科学技术出版社,2002.1217-1249.
- [6] L e-Gall-Recule,Jestin,Chagnaud,Blanchard,Jestin,et al.Ex-pression of muscovy duck parvovirus capsid proteins(VP2 andVP3) in a baculovirus expression system and demonstration ofimmunity induced by the recombinantproteins[J].J-gen-virol.Society forGeneralMicrobiology.Sep1996.V.77(pt.9):2159-2163.
- [7] Alexandrow.M,Alexandrova.R,Alexandrov.L,etal.Fluores-cent and electron-microscopyimmunoassay employing poly-clonal and monoclonal antibodies for detection of goose par-vovirus infection[J].JVirolMed,1999,79(1):21-32.
- [8] TakeharaK,NakataT,TakizawaK,et al.Expression of gooseparvovirus infection[J].Arch virol,1999,144:1639-1645