- 许禔森;
为进一步掌握山东省禽类隐孢子虫病的流行状况,自2007年3月至2008年4月对山东省6个地市及18个县市的禽类进行了调查。共采集6190份粪样,经饱和蔗糖溶液漂浮法和改良抗酸染色法检查,隐孢子感染率为20.46%。根据形态学特征,将分离得到的隐孢子鉴定为贝氏隐孢子虫。调查结果表明,不同饲养方式、不同种类、不同地区和季节的禽类隐孢子虫感染率有明显差异。
2009年04期 v.45 3-5页 [查看摘要][在线阅读][下载 103K] [下载次数:153 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:6 ] |[阅读次数:2 ] - 郭杨;陈世界;郭万柱;
根据GenBank登录的高致病性PRRSV Nsp2基因序列利用Primer Express 3.0软件设计合成了引物和探针;对荧光定量PCR的反应条件进行了优化,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法。同时用建立的检测方法对以定量的10倍系列稀释质粒pMD-Nsp2为标准品进行了检测,并与常规RT-PCR做了对比。结果显示,所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法灵敏度可达3.15拷贝,比常规RT-PCR灵敏度高100倍。用该方法对3份不同的标准品进行了重复检测,结果表明,该方法具有良好的重复性,可满足当前高致病性PRRSV的诊断需要。
2009年04期 v.45 6-8页 [查看摘要][在线阅读][下载 269K] [下载次数:162 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:3 ] |[阅读次数:2 ] - 胡北侠;黄艳艳;姜宁朋;张伟;张秀美;
从病鸡输卵管积液中分离了一株新城疫病毒(命名为SHY06),经蚀斑纯化后测定其鸡胚平均死亡时间和1日龄雏鸡脑内致病指数分别为52 h和2.0,F蛋白裂解位点氨基酸序列为112-RRQKRF-117,符合强毒NDV的特征。根据F基因(1-374 bp)对SHY06和19个NDV参考毒株进行基因分型结果表明SHY06属于基因Ⅶ型。F基因氨基酸序列同源性比较显示SHY06与基因Ⅶ型NDV分离株同源性为97.5%~99.5%,与基因Ⅸ型NDV(F48E9等)同源性为91.7%~92.4%,与基因Ⅱ型(疫苗株LaSota等)同源性为89.2%。HN基因氨基酸序列同源性比较显示SHY06与近年来分离株同源性较高,为92.1%~99.7%,与疫苗株(LaSota)和标准强毒株(F48E9)同源性较低,分别为87.6%和89.9%。
2009年04期 v.45 9-12页 [查看摘要][在线阅读][下载 261K] [下载次数:124 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:2 ] |[阅读次数:1 ] - 汤波;范学政;徐璐;王琴;黄伟;刘俊;沙莎;陈蕾;周远成;
采用猪瘟单抗对猪瘟病毒石门株E2基因噬菌体随机肽库(SM-E2库)进行淘洗以研究猪瘟病毒E2抗原表位。运用猪瘟单克隆抗体WH303、WH211和M56对SM-E2库进行4轮生物淘洗,对阳性克隆再经噬菌体原位杂交、特异PCR测序分析,然后人工合成阳性多肽进行ELISA反应。经鉴定分析发现单抗WH303从SM-E2库中筛选得到一段CSFV特异的抗原多肽IECTAVSPTTLRTEVVKT,并且该段多肽与已知CSFV表位TAVSPTTLR极为相似;单抗WH211和M56未能筛选到包含CSFV序列的克隆。结果表明,利用靶基因噬菌体随机多肽库筛选抗原表位能够得到更接近于真实表位的抗原表位。
2009年04期 v.45 12-15页 [查看摘要][在线阅读][下载 146K] [下载次数:299 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:1 ] |[阅读次数:1 ] - 刘俊;王琴;范学政;徐璐;黄伟;汤波;沙莎;陈蕾;周远成;
为研究CSFV感染后在体外的传播途径、排毒规律,针对CSFV基因组设计了一对引物和一条探针,建立了一套CSFV荧光定量PCR(FQ-PCR)检测方法,并以质粒为标准品得到扩增标准曲线。对18个CSFV阳性质控样本检测全阳性,6个CSFV阴性质控样本检测全阴性,显示良好敏感性和特异性。应用此方法对石门株感染的16头60日龄长白猪和1头阴性对照猪的粪便、尿液、眼分泌物和唾液中病毒含量进行了动态测定,结果表明从感染后第1天到频死前第8天,粪便中均能检测出病毒;尿液和眼分泌物至少能从第3天,唾液从第4天开始检测出病毒,且病毒含量呈增加趋势。本研究对急性感染猪瘟病毒猪体外排毒规律进行了系统研究,为弄清CSFV感染病程、致病机理及临床诊断奠定了重要理论基础。
2009年04期 v.45 15-17页 [查看摘要][在线阅读][下载 173K] [下载次数:231 ] |[网刊下载次数:0 ] |[引用频次:8 ] |[阅读次数:1 ]